分子生物学试剂(简介,概念,常用试剂)
Release Time:2019-11-22分子生物学试剂简介:
分子学生物试剂是细胞内活性分析所需的物质,通常在样品制备过程中使用,高质量的混合物可以有效地处理细胞成分,从而提高显微镜观察的可行性。

分子生物学概念:
分子生物学是生物科学的一个分支,涉及细胞各种系统中生物分子之间的生物学活性的分子基础,包括DNA,RNA,蛋白质及其生物合成之间的相互作用以及这些相互作用的调控。分子生物学过程使用的试剂也可以统称为为分子试剂。以下是以下常用分子缓冲液试剂介绍:
常用的分子学生物试剂(去离子水溶液试剂)方法介绍:
- 1mol/L亚精胺(Spermidine)溶液: 将亚精胺2.55g溶解于足量的去离子水中,最终溶解体积为10ml,然后分装成易于存贮的容量后存于-20℃条件下。
- 1mol/L精胺(Spermine)溶液:溶解3.48g精胺于足量的去离子去离子水中,使终体积为10ml,分装成小份贮存于-20℃条件下。
- 10mol/L乙酸胺(ammonium acetate)溶液:将77.1g乙酸胺溶解于去离子水中,加去离子水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜或针式滤器过滤除菌。
- 10mg/ml牛血清蛋白(BSA)溶液:加100mg的牛血清蛋白(第五组份或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml去离子水中(为减少变性, 必须将牛血清白蛋白加入去离子水中,而不是将去离子水加入蛋白),容器盖盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加去离子水定容至10ml,然后分装成小份贮存于-20℃条件下。
- 1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液:在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml去离子水,按照存储条件分装成所需规格贮存于-20℃条件下,或量取100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的去离子水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
- 8mol/L乙酸钾(potassium acetate)溶液:溶解78.5g乙酸钾于足量的去离子水中,加去离子水定容至100ml。
- 1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的去离子水中,加去离子水定容至100ml。
- 3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三去离子水乙酸钠于约90ml去离子水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加去离子水定容至100ml。
- 0.5mol/L EDTA溶液:需要配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。或精确称量186.1g的Na2EDTA•2H2O和20g的NaOH,并溶于去离子水中,定容至1L。
- 1mol/L HEPES缓冲液:将23.8gHEPES溶于约90ml的去离子水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用去离子水定容至100ml。
- 1mol/L HCl溶液:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的去离子水中,混合均匀即可。
- 25mg/ml IPGT溶液:溶解250mg的IPGT(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)于10ml去离子水中,按照存储条件分装成所需规格贮存于-20℃条件下。
- 1mol/LMgCl2溶液:溶解20.3g MgCl2•6H2O于足量的去离子水中,定容至100ml。
- 100mmol/L PMSF缓冲液:溶解174mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容至10ml。按照存储条件分装成所需规格并用铝箔将装液管包裹 或贮存于-20℃条件下。
- 20mg/ml蛋白酶K(proteinase K)溶液:将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml去离子水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加去离子水定容至10ml,然后分装成小份贮存于-20℃条件下。
- 10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠去离子水溶液中(pH 5.0)。溶解后于去离子水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃条件下贮存。(配制过程中要戴手套)
- 5mol/L氯化钠(NaCl)溶液:溶解29.2g氯化钠于足量的去离子水中,定容至100ml。
- 10N氢氧化钠(NaOH)溶液:溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L去离子水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用去离子水定容至1L。
- 10%SDS(十二烷基硫酸钠)溶液:精确称量100gSDS慢慢转移到约含0.9L的去离子水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用去离子水定容至1L。
- 2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol)溶液:溶解36.4g山梨(糖)醇于足量去离子水中使终体积为100ml。
- 100%三氯乙酸(TCA):在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml去离子水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。(稀释液应在临用前配制)
- 2.5% X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷)缓冲液:溶解25mg的X-gal于1ml的二甲基甲酰胺(DMF),用铝箔包裹装液管,贮存于-20℃条件下。