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如何配制MOPS缓冲液

Release Time:2019-11-23

如何配制MOPS缓冲液
       MOPS是MOPS缓冲液中缓冲化合物的简称,MOPS中文全称是3-(N-吗啉代)丙烷磺酸,pKa为7.20,是许多需要中性pH的生物系统的良好缓冲剂,HEPES是化学上相似的pH缓冲化合物。
1、10x MOPS缓冲液配制的原料
  • 83.7克MOPS;分子量209.3 g / mol
  • 13.6克醋酸钠,三水合物; MW 136.1 g / mol(注意:无水NaAc仅82 g / mol或8.2g)
  • 3.7克EDTA,二水合二钠; MW 372.24 g / mol(再次检查所储存盐的MW)
2、MOPS缓冲液的配置步骤
  • 加入800毫升无核酸酶的蒸馏水;混合溶解;
  • NaOH调节至pH 7(在无核酸酶的蒸馏水中制备);
  • 加去离子水至1000毫升的最终体积。
3、MOPS缓冲液的注意事项
  • 过滤消毒或高压灭菌
  • 室温保存
  • 避光、如果溶液较暗(黄色就可以),请勿使用。
4、最终浓度为10x
  • 400 mM MOPS(缓冲)
  • 100毫米NaAc
  • 10 mM EDTA(Mg2 +螯合抑制核酸酶)
5、MOPS缓冲液的稳定性
      与通常的看法相反,MOPS缓冲液具有足够的热稳定性,可以进行高压灭菌。溶液将变为黄色,但这不会影响其缓冲能力。例如:Farrell RNA方法,稻草色的缓冲液很好,但不要使用较深的缓冲液。
 
6、MOPS缓冲液的应用领域
  • RNA琼脂糖凝胶
  • NuPAGE电泳
  • bis-Tris SDS-PAGE



 
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