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高效液相色谱法的分类及其分离原理

Release Time:2020-07-17

一、高效液相色谱法的分类及其分离原理简介:
高效液相色谱仪分为:液-固色谱,液-液色谱,离子交换色谱,凝胶色谱。
1.液固色谱法(液固吸附色谱法)固定相是一种固体吸附剂,它根据物质在固定相上的不同吸附而分布。
2.液-液色谱法(液-液分配色谱法)将液体固定剂作为固定相涂在支持物上。

二、高效液相色谱法的分类及其分离所需材料及试剂:
聚酰胺、甲醇、乙醚、苯、乙腈、乙酸乙酯、吡啶
三、高效液相色谱法的分类及其分离步骤
1.液固色谱法
①液固色谱作用机理
吸附剂:一些多孔的固体颗粒物,表面经常有分散的吸附中心,在流动相S中将流动相中的溶质分子X(液相)带入色谱柱后,在与载液流动期间发生以下交换反应:X(液相)+ nS(吸附)
它的作用机理是溶质分子X(液相)和溶剂分子S(液相)在吸附剂活性表面上的竞争性吸附。吸附反应的平衡常数K为:K值小:溶剂分子具有很强的吸附力,吸附的溶质分子很少,先从色谱柱中流出K值越大:表明该组分分子的吸附能力越强,然后流出色谱柱,吸附剂表面发生的吸附-解吸平衡是液-固色谱分离的基础。
②液固色谱的吸附剂和流动相
常用的液固色谱吸附剂:薄膜硅胶,全多孔硅胶,薄膜氧化铝,全多孔氧化铝,分子筛,聚酰胺等。
一般规则:对于固定相,非极性分子与极性吸附剂(例如硅胶,氧化铜)之间的相互作用非常弱,分配比k小,保留时间短;但极性分子与极性吸附剂之间的相互作用很强,分布比大于k,且保留时间长。
流动相的基本要求:样品必须溶于流动相,流动相粘度低,流动相不得影响样品的检测。常见的流动相:甲醇,乙醚,苯,乙腈,乙酸乙酯,吡啶等
③液固色谱法的应用
通常用于分离极性不同的化合物,是否分离不同类型的有机化合物;官能团的数目以及有机化合物的不同异构体;但是液-固色谱法不适合分离同系物,因为液-固色谱法相对分子质量不同的同系物的选择性不高。
2.液-液色谱法
①液液色谱作用机理
当溶质分布在两相之间时,固定溶液中溶解度较低的组分更难以进入固定溶液并在色谱柱中移动得更快,固溶体中溶解性较高的组分往往会进入固溶体,色谱柱中的向前迁移速度较慢,从而达到分离的目的。
-液色谱法和液-液萃取的基本原理相同,均服从分布规律:K = Csolid / CliquidK值大的组分保留时间长,然后流出色谱柱。

四、实验所需试剂清单:
1 聚酰胺树脂,TECH级                                               JSH60408  
2 甲醇                             JT25999  
3 JT24024  
4 乙腈 JY0313  
5 乙酸乙酯 JT11988  
6 吡啶 JT2369  
7 乙醚(Diethyl Ether) HCT005811  


 
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