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碱性裂解法（大肠杆菌,实验简介,实验步骤,实验所需试剂清单）
Release Time：2020-07-29一、碱性裂解法实验简介：
二、碱性裂解法实验所需材料及试剂：
三,碱性裂解法实验步骤：
1.将含有质粒的1％大肠杆菌细胞连接到2毫升 LB培养基中。
2.在37摄氏度下振荡培养石英。
3.取1.5毫升细菌置于Ep管中，以离心4000rpm，3分钟，弃去上清液。
4.加入0.1毫升溶液I（1％葡萄糖，EDTA 50mM / L pH8.0，Tris-HCl pH8.025mM / 升）并充分混合。
5.加入0.2毫升溶液II（0.2 mM / L NaOH，1％SDS），轻轻涡旋震荡，将其置于冰浴中5分钟。
6.加入0.15毫升预冷的溶液III（5 mol / L KAc，pH4.8），轻轻混匀，将其置于冰浴中5分钟。
7.离心10,000 rpm，20分钟，然后将上清液转移到另一个新的Ep管中
8.加入等体积的异戊醇，颠倒混匀，然后在0摄氏度放置10分钟。
9.离心10,000 rpm，20分钟，然后弃去上清液。
10.用0.0005升75％乙醇洗涤一次，然后沥干所有液体。
11.将沉淀物干燥后，将其在0.05毫升 TE缓冲液中降解。
四,实验所需试剂清单：
| 序列 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | 10ul白吸头(灭菌) | FT-10-H | ||
| 2 | 1.5毫升尖底连盖离心管 | F-EP015 | ||
| 3 | Tris-HCl | HC2055 | ||
| 4 | EDTA | WSH44880 | 65501-24-8 | |
| 5 | NaOH | JT8650 | 1310-73-2 | |
| 6 | SDS | SS0013 | 151-21-3 | |
| 7 | 异丙醇 | JSH64785 | 453-11-2 | |
| 8 | 无水乙醇 | JT26000 | 64-17-5 | |
| 9 | 1000ul蓝吸头 | FT-1000 | ||
| 10 | 200ul黄吸头 | FT-200 |
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