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凝胶迁移实验实践分享（实验介绍，实验所需试剂，实验流程）
Release Time：2020-07-24一、凝胶迁移实验简单介绍：
二、凝胶迁移实验所需材料和试剂：
ATP、无水乙醇、10微升吸头、乙酸铵、200微升黄吸头
三、凝胶迁移的实验流程：
※ 探头标记：
（1）按照以下方法设置探针标记的反应系统：
1. 探针（1.75pmol /μl）2微升、T4多核苷酸激酶缓冲液（10X）1微升、无核酸酶水5微升、[γ-32P] ATP（3,000mCi / mmol，10mCi / ml）1微升、T4多核苷酸激酶（5-10U /μl）1微升、总体积10微升，加入同位素，涡旋混合，再加入T4多核苷酸激酶混合。
（2）采用水浴在37°C、10min。
（3）加入1微升探针标记终止溶液中，混合均匀，终止探针标记反应。
（4）加入89微升TE，混合均匀后。可以使用少量探针来检测标记的效率。
（5）带标记的探针最好立即使用，最长的使用时间一般不超过3天。标记的探针可以在零下20摄氏度下保存。
※ 探针的纯化：
通常出于实验目的，不必纯化标记的探针。在某些情况下，纯化的探针将改善EMSA的电泳结果。为了纯化，您可以按照以下步骤操作：
（1）对于100微升的标记探针，25微升的5M乙酸铵，然后添加2体积或200微升的无水乙醇，并充分混合。
（2）在-70℃至零下80摄氏度下下沉淀1h，或在零下20摄氏度下沉淀。
（3）在4°C下以12000g-16000g离心30min。小心除去上清液，切勿触摸水槽。
（4）在4°C下以12000克-16000克离心1min。小心吸出剩余的液体。
（5）加入100微升TE是沉淀物完全溶解。标记的探针最好立即使用，标记的探针可以在零下20摄氏度下保存（不超过三天）。
四、凝胶迁移实验所需试剂清单：
| 序列 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | 10ul白吸头(灭菌) | FT-10-H | ||
| 2 | 乙酸铵 | CJ0001 | 631-61-8 | |
| 3 | 无水乙醇 | JT26000 | 64-17-5 | |
| 4 | ATP | WSH46538 | 501437-28-1 | |
| 5 | 200ul黄吸头 | FT-200 |
