带您学些HRP标记技术实验(实验介绍,实验步骤,实验所需试剂)
Release Time:2020-07-24一、HRP标记的实验简单介绍
二,HRP标记实验操作步骤
1. 取HRP 10毫克/毫升 5ml,溶液为棕黄色,加入0.06摩尔/升的NaIO4,5毫升,溶液立刻变为灰绿色,在4℃条件下静置约30min。
2.加入0.16摩尔/升,5mL乙二醇毫升,溶液变回棕黄色,RT,静置30min。
3.加入抗体 5毫克CB,4℃透析过滤。
4.再加入5毫克/毫升 NaBH4 5毫升,加入后溶液有气泡产生,在室温下静置两小时。
5. 50%饱和硫酸铵盐析一次,12000rpm,4℃离心30min。沉淀用5V毫升 0.01摩尔/升PB重悬。装入透析袋。
6. 溶液在0.01摩尔/升PB,pH7.4中透析过滤。
三,HRP标记实验所需试剂
1) 10毫克/毫升 HRP、0.06摩尔/升NaIO4、0.16摩尔/升乙二醇、2.5毫克/毫升 NaBH4、0.01摩尔/升L磷酸盐缓冲液,pH7.4、碳酸盐缓冲液(Na2CO3 0.7952克NaHCO3 1.4702克溶于500毫升蒸馏水中,调pH值到9.5)、
序号 | 名称 | 货号 | CAS | 备注 |
1. | HRP(辣根过氧化物酶) | SS2255 | 9003-99-0 | |
2. | IgG | SC0364 | 10047-33-3 | |
3. | NaIO4 | JH0604 | 7790-28-5 | |
4. | 乙二醇 | JT25994 | 107-21-1 | |
5. | NaBH4 | HCC344871 | 16940-66-2 | |
6. | 硫酸铵 | CJ0207 | 7783-20-2 | |
7. | 碳酸钠 | JT0602 | 497-19-8 | |
8. | NaHCO3 | SS1340 | 144-55-8 | |
9. | 磷酸盐缓冲液 | HC1488 |