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带你学习染色体C显带技术

Release Time:2020-07-20

一、染色体C显带技术简介:
染色体C显带是染色体标本用强碱(NaOH或Ba(OH))进行热处理后,Giemsa将着丝粒周围的区域和异染色质区域染色为深色,而染色体两臂的常染色质部分只有亮色轮廓,这是一种特殊的条带化方法,不显示染色体上的条带,主要显示着丝粒区域和异染色质区域的变化,称为着丝粒异染色质法,因此简称为C波段,常用的是CBG方法(使用Giemsa的氢氧化钡进行C波段分析),然后用Ba(OH)?处理并用Giemsa染色。

二、染色体C显带技术所需材料及试剂:
NaOHBa(OH)?、HClSSC、Giemsa稀释液
三、染色体C显带技术的实验步骤
1.首先制膜和烘烤与G带技术相同(65°C,2小时)。
2.染色体标本在室温下用0.1 N HCl水解15分钟,然后用蒸馏水冲洗。
3. 2%Ba(OH)?,在65℃下处理10分钟,然后用蒸馏水冲洗。
4. 2×SSC,65°C放置1小时。
5.洗涤和冷却后,用1:10 Giemsa稀释液染色7分钟。
6.冲洗后,使其干燥并在显微镜下检查。
7.核型分析:通过低倍显微镜选择标本,然后更换为油镜,以分析染色体上着丝粒和异染色质区域的变化,选择典型的分裂相以放大并在显微照片后打印,然后根据C波段分析标准进行剪切和粘贴。

四、染色体C显带技术的注意事项:
1.染色体制备后可立即进行C显带。胶片的年龄不能太长,会影响C波段的质量。
2.染色体标本的质量较好,并且在分裂相周围无细胞质等背景时,不需要盐酸水解。

五、染色体C显带技术实验所需试剂清单:
序列 产品名 货号 CAS 备注
1 NaOH                                  JT8650 1310-73-2  
2 Ba(OH)? WSH40129 17194-00-2  
3 HCl BD0190 7647-01-0  
4 SSC缓冲液 HC1632    
5 吉氏色素 SX0115 51811-82-6  
以上为染色体C显带技术需要的缓冲液和生物化学类试剂。

 
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