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细胞凋亡（实验简介,所需材料,实验步骤,注意事项,所需试剂）
Release Time：2020-07-17一、细胞凋亡实验简介
细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界，在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事件的组合，是细胞遵循一定规律自己结束生命的自主控制过程。
二、细胞凋亡实验所需材料
1、试剂：三尖杉酯碱，0.1mol/L Tris-HCl（pH7.5）,PBS，SDS,异丙醇，乙醇，溴酚蓝，TBE电泳缓冲液，溴乙锭。Ho33342母液：2mmol/L。
2、仪器设备：荧光显微镜，电泳仪，电泳槽，微量加样器（1ml，100μl）0.5、1.5ml离心管，载玻片，盖玻片。
三、细胞凋亡实验步骤
1、三尖杉酯碱诱发HL-60细胞凋亡
（1）实验前约24小时，接种两瓶HL-60细胞，标记①、②，每瓶含约6ml培养液，置37℃，5%CO2培养箱培养。
（2）实验前约2.5小时，当细胞密度达到70%，①号瓶加入三尖杉酯碱200μl，使终浓度为1μg/ml，②号瓶中加入同等量PBS（pH7.4）作对照。共同放入培养箱中继续培养2.5小时。
2、Ho33342和PI双重染色鉴别三种细胞
（1）染色：将瓶中的细胞摇匀取200μl于1.5ml的离心管中，加入Ho33342母液2μl，PI 20μl，染色15分钟。
（2）滴片：取一载玻片用双面胶围成一小室，从离心管中各取以上染色后的细胞悬液10μl，加入小室内盖上盖玻片，荧光镜下用紫外激发光，高倍镜下观察，区别三种细胞，并注意三者比例。
四、细胞凋亡实验注意事项
1、诱导培养HL-60细胞时间要准确；
2、荧光显微镜下观察细胞时，由于荧光易碎灭，观察时要尽量快。
五、细胞凋亡实验所需试剂清单
| 序号 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | PBS缓冲液 | HC2031 | ||
| 2 | 乙醇 | JT26000 | 64-17-5 | |
| 3 | 溴化乙锭 | SS1957 | 1239-45-8 | |
| 4 | SDS | SS0013 | 151-21-3 | |
| 5 | 三尖杉酯碱 | |||
| 6 | Tris-HCl缓冲液 | SS6230 | ||
| 7 | 异丙醇 | JT25997 | 67-63-0 | |
| 8 | 溴酚蓝 | SX0029 | 115-39-9 | |
| 9 | TBE缓冲液 | HC1412 |
