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印迹膜蛋白染色实验
Release Time：2020-07-17一、印迹膜蛋白染色实验简介
蛋白质印迹是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
二、实验所需材料
1. 2%丽春红S浓贮存液（3-羟基-4-[2-磺基-4-硫代-苯偶氮基]-2，7-萘二磺酸）：溶于30%三氯醋酸和30%磺基水杨酸中。贮存液可在室温下稳定存放1年以上。
2. PBS。
三、实验操作步骤
1. 在染色之前，先配制丽春红S的应用液。即将2%的丽春红S浓贮存液用1%醋酸1:10稀释即成为应用液（注意：如果使用硝酸纤维膜，须将丽春红S应用液更换为用水1:10稀释）；
2. 用丽春红S应用液将PVDF膜洗1次；
3. 加入新鲜稀释的丽春红S应用液，并在室温下搅动5~10min；
4. 将PVDF膜放入PBS中漂洗数次，每次1~2min，并更换PBS；
5. 根据需要将转印部位和分子量标准位置进行标记，至此PVDF膜可用于封闭和加入抗体。
四、实验所需试剂清单
| 序号 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | PBS缓冲液 | HC2031 | ||
| 2 | 三氯醋酸 | JT12006 | 76-03-9 | |
| 3 | 5-磺基水杨酸 二水合物 | JQ0004 | 5965-83-3 | |
| 4 | 丽春红 | SX0097 | 6226-79-5 |
