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zo-1免疫荧光染色实验
Release Time：2020-07-15一、免疫荧光染色实验简介
疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白，主要包括蛋白和一抗结合，其次是带有荧光基团的二抗识别并结合一抗，荧光显微镜下即可观察到荧光。
二、zo-1免疫荧光染色实验所需材料
PBS，甲醛，曲拉通X-100，BSA，甘油等
三、zo-1免疫荧光染色实验步骤
1. 细胞在盖片上生长融合到95%-100%后，从孵箱中取出。
2. 用预温的PBS洗3次，每次10分钟。
3. 4%的甲醛室温固定20-30分钟。
4. PBS洗3次，每次10分钟。
5. 0.2%曲拉通X-100透化2-5分钟。
6. PBS洗3次，每次10分钟。
7. 5%BSA室温封闭30分钟。
8. 加一抗（用1%BSA稀释）放在湿盒里，4度过夜。
9. PBS洗3次，每次10分钟。
10. 加二抗(用1%BSA稀释)30分钟，闭光。
11. PBS洗3次，每次10分钟。
12. 95%甘油封片。
四、实验注意事项
4%甲醛，0.2%曲拉通X-100，5%BSA均用1×PBS稀释。在使用PBS缓冲液漂洗时，都要漂洗干净并且要测下pH值，可以使用PBS多清洗几次，也可以延长PBS清洗时间。
五、实验所需试剂清单
| 序号 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | PBS缓冲液 | HC2031 | ||
| 2 | 曲拉通X-100 | SS0049 | 9002-93-1 | |
| 3 | 甲醛溶液 | JT22679 | 50-00-0 | |
| 4 | 苯磺酰胺（BSA） | HXH504384 | 98-10-2 | |
| 5 | 甘油 | JT26018 | 56-81-5 |
