果蝇唾腺染色体实验
Release Time:2020-07-15一、果蝇唾腺染色体实验简介:
双翅目昆虫(果蝇,蚊子等)幼虫期的唾液腺细胞非常大,其核中的染色体称为唾液腺染色体(唾液染色体)。因为它们比普通染色体大100-150倍,宽约5μm,长约400μm,所以它们也被称为巨型染色体(巨型染色体)。此外,唾液腺染色体被复制多次(212 = 4096)而不被分开,因此存在另一条多线染色体(多张性染色体)。唾液腺染色体在染色后具有不同的阴影,并具有密集的条纹,这些条纹的数量和位置通常是恒定的,这标志着样品的特征。当染色体上存在结构性畸变,例如缺失,重复,倒位,易位等时,唾液腺染色体上很容易识别。
二、果蝇唾腺染色体实验所需材料及试剂:
实验仪器:解剖镜,显微镜,解剖针,镊子,玻璃片,盖玻片,吸收纸。
实验药物:0.7%生理盐水,1 mol盐酸,蒸馏水和改良品红。
实验材料:果蝇的任何菌株或杂种的三龄幼虫,已经爬过管壁并且尚未化蛹。
三、果蝇唾腺染色体实验步骤
1.将玻片放在解剖镜的台上(黑色背景),并加一滴盐水将果蝇的三龄幼虫移入其中,左手握住解剖针刺幼虫在前部的1/3处,以固定幼虫,而右手握住另一只,坚决,迅速,有力地将解剖针幼虫的顶部向右拉,撕下蠕虫体的前端,唾液腺暴露出来,唾液腺为半透明,蝙蝠状,前端较细且粗糙,有时它们成对粘在一起以形成“ V”形,乳白色或淡黄色的姨妈有时会附着在横向上,此时,唾液腺应保持完整,因为食道和肠子也是半透明的,所以如果唾液腺不完整,则很难判断唾液腺和连接的去除情况。
2.取下唾液腺并将其移至载玻片上的干净位置,然后取下剩余的器官和组织,如果姨妈附着在唾液腺上,应去除乳白色或淡黄色的姨妈,并保留半透明的唾液腺。
3.用吸收纸吸收过量的生理盐水,加一滴1mol盐酸,将其在室内压碎2分钟,然后干燥。
4.用一滴蒸馏水冲洗并干燥两次,吸水纸不应太靠近样本,以免丢失样本。
5.加入一滴修饰的品红色洋红并染色3-5分钟,染色时,用镊子轻轻将唾液腺捣碎。
6.用镊子盖玻片至45,拐角缓慢下降,气泡被排出,拿起吸水纸并将其铺在盖玻片上,用食指和左手的拇指固定盖玻片的位置,然后用右手停止拇指,为了传播染色体,可以站起来,将上半身的重量放在右手拇指上,效果会更好。
蛹及三龄幼虫
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果蝇第三龄幼虫
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选择果蝇唾液腺
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挑选唾液腺
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唾液腺和中间体之间的区别
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果蝇唾液腺
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添加氯化唾液腺
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果蝇唾液腺染色体
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果蝇唾液腺染色体模式图
四、实验所需试剂清单:
1 | 生理盐水 | HC0894 | |
2 | 酸性品红水溶液(1%) | HC0636 |