购物车 
慢病毒转染细胞实验（实验简介,实验材料,实验步骤）
Release Time：2020-07-12一、慢病毒转染细胞实验简介：
慢病毒（Lentivirus）是一种逆转录病毒。可用于依赖传统转染试剂进行瞬时转移且难以转染的感染细胞系，例如原代细胞，悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞，感染后可与感染细胞整合，细胞的基因组可以长时间稳定表达。
二、慢病毒转染细胞实验材料：
培养皿、培养基、聚乙烯、离心管、离心机
| 序列 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | 1.5ml尖底连盖离心管 | F-EP015 | ||
| 2 | 2ml圆底连盖离心管(灭菌） | F-EP020-H | ||
| 3 | 90mm*15mm 塑料培养皿(灭菌） | FM-90-X | ||
| 4 | 90mm*20mm 塑料培养皿(灭菌） | FM-90-G | ||
| 5 | 10*10cm方形塑料培养皿(灭菌） | FM-100-F | ||
| 6 | 聚乙烯 | LSH78343 |
三、慢病毒转染细胞实验操作步骤：
<1>.慢病毒转染贴壁细胞
1.慢病毒转染前18-24小时，将贴壁细胞以1×10 ^ 5 /孔的速率铺展到24孔板中，慢病毒转染过程中的细胞数约为2×10 ^ 5 /孔。
2.第二天，用2 ml含6μg/ ml聚乙烯的新鲜培养基替换原始培养基，并添加适量的病毒悬浮液，在37°C下孵育。
3.（此步骤选择对聚乙烯毒性敏感的细胞）4小时后，添加2ml新鲜培养基稀释聚乙烯。
4.继续培养24小时，用新鲜培养基代替含病毒的培养基。
5.继续培养。如果慢病毒包含荧光蛋白，则转染后48小时通常会显示明显的荧光表达，而72小时后会更加明显，如果需要FACS检测转染效率，可以在转染后72-96小时进行，如果慢病毒包含抗性基因并且需要用药物进行筛选，则可以在转染后3-4天开始使用药物。
<2>.慢病毒转染悬浮细胞的实验方法
1.在2×10 ^ 5 / ml悬浮细胞中，以6μg/ ml和适量的病毒添加聚乙烯，并充分混合，在37°C下孵育，或在室温下以150g离心4小时（一些难以转染的细胞系可以使用此步骤来提高转染效率）。
2.（选择对聚乙烯毒性敏感的细胞作为此步骤）4小时后（或离心结束后），添加等体积的新鲜培养基以稀释聚乙烯。
3.继续培养3-4天，中间根据细胞的生长情况，可以进行传代或液体交换。
