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聚合酶链式反应（PCR）实验
Release Time：2020-07-12一、聚合酶链式反应（PCR）实验简介：
聚合酶链反应（PCR）是一种用于扩展特定DNA片段的分子生物学技术。它可以用于体外特殊的DNA复制。 PCR的最大特点是它可以显着增加痕量DNA。
二、聚合酶链式反应（PCR）实验实验材料：
（1）移液枪：200ul，10ul
（2）吸头：200ul，20ul
（3）吸头台：放置200ul和20ul吸头
（4）EP管：1.5ml，100ul
（5）塑料制品：（包括吸头，EP管等）送入高压3次，在测试前将枪头添加到吸头台中。
2、试剂配置及实验准备：
（1）双蒸馏水：将100ml盐水瓶中装满40ml蒸馏水，送至高压，然后分成几个1.5ml EP管，在-20℃下保存以备将来使用。
（2）PCR所需的各种试剂：
ddH?O 37.5ul、10mM dNTP 1ul、10×PCR缓冲液5ul、25mM氯化镁3ul（加入前摇匀）、上游引物1ul、下游引物1ul、模板cDNA 1ul
| 序列 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | 10ul白吸头(灭菌) | FT-10-H | ||
| 2 | 200ul黄吸头（灭菌 | FT-200-H | ||
| 3 | 1000ul蓝吸头（灭菌） | FT-1000-H | ||
| 4 | MgCl? | HC1115 |
四、实验操作步骤：
1.准备100ul EP管
2.依次添加到试管中：（50ul反应系统）
ddH?O 37.5ul、10mM dNTP 1ul、10×PCR缓冲液5ul、25mM氯化镁3ul（加入前摇匀）、上游引物1ul、下游引物1ul、模板cDNA 1ul
3.稍微离心
4. 100°C沸水浴1分钟
5.趁热添加0.5ul Tag酶（在冰上操作）
6.加入50ul液体石蜡密封
7.以10000rmp离心1分钟
8. PCR条件
※ 在94℃下1分钟（2）58℃50秒（3）72℃1分30秒（4）在40个循环之后，在72℃下10分钟后将温度保持在4℃。
9.以10000rmp离心5分钟
10.将较低的水相转移至新的0.65ml EP管中，并在-20℃储存。
