一种确定细菌浓度的简单方法:McNeil比浊法
Release Time:2020-07-10一、McNeil比浊法测定细菌浓度实验介绍:
McFarland浊度管是McFarland为不同的微生物浊度发明的标准浊度管。具体的制备方法是基于硫酸和氯化钡的比例,并有一张表格要检查,以不同比例产生的硫酸钡沉淀物的浓度是不同的,并且具有固定值。
McNeil浊度管的配置如下:
管 号 (McFarland) |
0.5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
0.25%BaCl 2 ( ml ) |
0.2 |
0.4 |
0.8 |
1.2 |
1.6 |
2.0 |
1%H 2 SO 4 (ml) |
9.8 |
9.6 |
9.2 |
8.8 |
8.4 |
8.0 |
细菌的近似浓度 ( × 10 8 /ml) |
1 |
3 |
6 |
9 |
12 |
15 |
二、实验操作方法:
1.轻轻摇动标准试管。
2.无菌操作将测得的肉汤培养物添加到直径与标准管相同的无菌试管中。
3.无菌地向试管中添加无菌生理盐水(NaCl),直到其浓度与所需的标准管相同。
技能:
1.用眼睛直视(需要经验,误差大)。
2.找到一张白纸,用平行线标记它,然后看一下(如图所示,在不同浓度的液体中,光的折射不同)。
序号 |
产品 |
CAS号 |
货号 |
备注 |
1 |
氯化钡 |
10361-37-2 |
|
|
2 |
硫酸 |
|
xxx
|
|
3 |
肉汤培养基 |
|
|
|
4 |
生理盐水 |
7732-18-5 |
|
三、预防措施:
1.如果测量的培养液不清楚,则通过从培养值中减去未接种的培养基值来校正细菌浓度。试管4(肉汤培养)-1试管(未接种的未接种肉汤试管)=试管3(校正后的读数)。
2.如果肉汤颜色较深,请将未接种的试管放在标准试管的后面,然后阅读。
四、实验注意事项:
1.最好对被测细菌进行梯度稀释涂层计数。
2.该浓度对应于大肠杆菌的浓度。如果是其他细菌,会有一定的差异,但是编辑者所做的几种细菌的差异在一个数量级之内,这适合普通实验。
3.该方法的准确性不是很高。如果细菌数更准确,请使用紫外分光光度计。