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蒽酮法测定可溶性糖
Release Time：2020-07-10一：蒽酮法测定可溶性糖实验简单介绍：
二，蒽酮法测定可溶性糖实验原理：
糖在浓硫酸的作用下，可通过脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物。含量成正比，因此可以用于糖的定量测定。由糖和蒽酮的反应在可见光区域产生的有色物质的吸收峰为630nM，因此在该波长下进行比色法。然而，当测量水溶性碳水化合物时，由于与蒽酮试剂的反应而导致测量误差增加。此外，不同的碳水化合物和蒽酮试剂具有不同的色深，果糖具有最深的显色性，其次是葡萄糖，半乳糖和甘露糖更浅，五碳糖的颜色更浅。不同比例的不同糖份会引起误差，但是在测量单个糖份时，可以避免此类误差。
三，实验所需的仪器仪表：
电子天平；容量瓶：4100ml，2 50ml;漏斗;几个小试管；电炉刻度移液器0.5ml1，2.0ml 3，5ml 4;分光光度计记号笔。
四：所需的试剂：
| 序号 | 名称 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | 蒽酮 | JT25818 | 90-44-8 | |
| 2 | 乙酸乙酯 | JT11988 | 141-78-6 | |
| 3 | 蔗糖 | SS1498 | 57-50-1 |
五.实验方法：
1.标准曲线的制备按照标准曲线的制备方法添加标准蔗糖溶液，然后向试管中依次加入0.5Ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5Ml浓硫酸，充分摇匀，立即投入试验将试管放入沸腾的水浴中，准确地将每支试管放置1分钟，取出并自然冷却至室温，以空白为对照，在630nM波长下测量其光密度，取光密度以纵坐标为单位，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线并找到标准线性方程式。
2.可溶性糖的提取取新鲜的植物叶子，擦去表面污垢，切碎并充分混合，称取0.10?0.30g，共3份，放入3个刻度试管中，加5?10ml蒸馏水，用塑料薄膜密封，在沸水中提取30分钟（提取两次），将提取物过滤到25毫升容量瓶中，反复冲洗试管和残留物，并将容量升至刻度。
3.显色的测定移取0.5ml样品提取液到20ml刻度试管中（重复两次），加入1.5ml蒸馏水。以下步骤与标准曲线测量相同，并测量样品的光密度。
4.计算可溶性糖的含量，通过标准线性方程式求出糖的含量，并根据式（1-1）求出试样中的糖含量。
可溶性糖含量（％）=（C×V / A×n）/（W×106）（1-1）
式中，C：采用标准方程式求取糖量（μg）； A：样品溶液的体积（Ml）；
V：提取液量（ml）； n：稀释系数；
W：组织重量（g）。
