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消化道平滑肌的生理特性及其影响因素实验

Release Time:2020-07-06
消化道平滑肌的生理特性及其影响因素实验
 

一.基本介绍:消化道平滑肌的生理特性及其影响因素
 
二.实验目的
1.观察生理特征,例如收缩力,自动节律和消化道平滑肌的可拉伸性。
2.了解胃肠道推进运动的实验方法,并观察药物对其的影响。
3.了解离体消化道平滑肌的实验方法,观察理化因素和药物对离体消化道平滑肌特征的影响,并分析其作用机理。
 
三.实验原理
       胃肠道平滑肌具有肌肉的一般特征,例如兴奋性和收缩性,以及其自身的特殊性。它具有自动律动和伸展功能,可以产生推进动作。它可以改变化学物质,温度和拉伸。刺激的影响更为敏感,并且还受到神经和液体因素的调节。副交感神经末梢释放的神经递质乙酰胆碱和抗胆碱能酶新斯的明等可增强肠胃蠕动,而M受体阻滞剂阿托品抑制肠胃蠕动。肾上腺素和交感神经末梢释放神经递质去甲肾上腺素可抑制胃肠蠕动。去甲肾上腺素从内脏神经的大多数神经末梢释放,通过减慢胃肠道基本电节律的频率和传播速度,可以减慢胃肠运动并减缓胃肠平滑肌的收缩。在动物实验中,木炭被用作标记物,以测量木炭在胃肠道中每单位时间的距离,这可以反映出胃肠道前进的能力和速度。

       小肠分离后,将其置于模拟人体内部环境的液体环境中,以使营养液的离子成分,渗透压,pH,温度,氧分压和营养成分类似于内部环境,可以在一段时间内维持肠道。平滑肌的正常活动和功能。药物可以通过与肠平滑肌上的受体相互作用来影响离体的肠平滑肌。
 
四.实验试剂及设备
序号 产品 cas号 货号 备注
1 乙酰胆碱 66-23-9 SC0410  
2 新斯的明 114-80-7 JQ2762  
3 阿托品 51-55-8 FF0438  
4 肾上腺素  51-43-4 YZM003350  
5 酚妥拉明 73-05-2 LSH58052  
6 普萘洛尔 14556-46-8 DBK501834  
7 台氏液      
8 葡萄糖 50-99-7 SC0001  
9 无钙台氏液      
10 0.9%氯化钠注射液 7647-14-5 JT0001  
11 5%炭末阿拉伯胶  9000-01-5 CG0167  
12 苦味酸溶液 88-89-1    


1.药品和试剂1:20000乙酰胆碱(乙酰胆碱),1:10000新斯的明(neostigmine),1:200 00阿托品(atropine),1:20000肾上腺素(肾上腺素),1:1000苯妥拉明(phentolamine),1:1000普萘洛尔,Tyrode溶液,成分:NaCl 8.0g,KCl 0.2g,CaCl2 0.2g,NaHCO3 1.0g,NaH2PO4 0.05g,MgCl2 0.1g,葡萄糖1.0g,将蒸馏水加至1000mL ),无钙Tyrode溶液(除去CaCl2和来自Tyrode溶液的MgCl2),0.9%氯化钠注射液,5%碳粉胶(10%阿拉伯胶作为溶剂),苦味酸溶液等。
2.设备生物信号记录和分析系统,恒温平滑肌浴管,曝气泵,肌肉张力传感器(范围在25g以下),通用支架,双凹形夹子,烧杯,注射器,电子天平,手术剪刀,眼科剪刀,眼科仪器镊子,直尺,玻璃板,1mL注射器,纱布等
 
五.实验方法与步骤
1.动物的分组和给药称重,标记18只昆明小鼠,随机分为对照组,新斯的明组和肾上腺素组,每组6只,雄性一半,雌性一半。对照组皮下注射0.9%氯化钠0.2mL / 10g,新斯的明组皮下注射1:10000新斯的明0.2mL / 10g,肾上腺素组皮下注射1:20000肾上腺素0.2mL / 10g。
2.给药后20分钟的胃肠道前进速度的测定和计算,对每只小鼠用0.2mL的5%木炭角叉菜胶悬浮液进行管饲,立即开始计时。木炭管饲后15分钟处死小鼠并使其脱臼。 ,打开腹部,去除整个胃肠道,将其放入含有少量盐水的皮氏培养皿中,用眼科剪刀剪下附着于肠的肠系膜,然后将肠轻轻??放在玻璃板上而不用拉扯(有在玻璃板上滴一点盐水,以防止肠子粘在玻璃板上。以胃的幽门为起点,回盲部为终点,测量小肠的总长度(cm),并测量幽门到木炭行进终点的距离(cm )。肠道,计算每只小鼠的木炭移动距离。全长的百分比是胃肠道的前进速度。
3.数据统计和分析将实验结果输入SPSS统计软件,并通过单因素方差分析(ANOVA)比较组之间是否存在差异。将结果记录在表31-2中。
4.准备分离肠平滑肌实验
1)启动恒温平滑肌实验系统。将蒸馏水添加到恒温浴中,并将蒂罗德溶液添加到平滑肌浴管中,使其达到浴管高度的2/3(约50mL)。打开电源,将工作温度设置为38°C,以将浴管中的温度升高并稳定在38°C左右。
2)准备标本以提起兔子的后肢以使其倒挂,用槌槌敲打兔子的头枕使其昏迷,切开剖腹手术,从交界处沿肠边界切开肠系膜将约20至30厘米的肠管(空肠)立即放在约4°C的蒂罗德溶液中,切成几段,每段长2至3厘米。如果肠腔中有很多内容物,则可以使用注射器抽吸Tyrode溶液并轻轻冲洗1-2次。基本清洁后,放入4℃提尔溶液中使用。
5.建立孤立的肠道平滑肌实验系统
   打开生物信号记录和分析系统,将实验信号的输入设置为张力,然后将张力传感器清零。
 
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