如何制作磷酸缓冲溶液(PBS),有哪些应用
Release Time:2019-11-22磷酸盐缓冲液简介:
磷酸盐缓冲液英文简称PBS,是生物学研究过程中最常用的缓冲溶液之一,通常用于免疫组织化学(IHC)染色,并且经常用于生物学研究中。 PBS是一种水性盐溶液,包含磷酸氢钠,氯化钠,在某些情况下还包含氯化钾和磷酸二氢钾。
PBS缓冲液可以用于免疫组织化学染色
免疫组织化学是指通过使用与生物组织中的抗原特异性结合的抗体的原理来检测组织切片的细胞中的抗原,例如蛋白质的过程。 免疫荧光染色是第一种免疫组织化学染色方法。
当使用荧光染料与抗体偶联时,由于抗原-抗体结合反应,抗原变得可见。 当在荧光显微镜下通过激发特定波长的光将其激活时,就会发生此过程。
溶液的渗透压和离子浓度与人体的渗透压和离子浓度相互匹配,它们是等渗的关系。
PBS缓冲液的配方(详细见产品说明)
可以通过几种方法制备PBS,有多个公式, 其中一些不含钾,而另一些则不含钙或镁。该方法比较简单,适用于10倍PBS储液(0.1M)。 但是,您也可以制作1X的储备液,或从此10X配方开始将其稀释至1X。 整个配制过程大约需要10分钟,并且还提供了添加Tween的选项。
需要制作PBS缓冲液的材料:
磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠、称重和称重船、磁力搅拌器和搅拌棒、已校准的pH探针以及用于调节pH的合适溶液、1L容量瓶、补间20(可选)。
如何制作PBS缓冲液
非无水试剂可以代替,但您必须重新计算每种试剂的适当质量,以容纳添加的水分子。
PBS缓冲液的用途
磷酸盐缓冲液英文简称PBS,是生物学研究过程中最常用的缓冲溶液之一,通常用于免疫组织化学(IHC)染色,并且经常用于生物学研究中。 PBS是一种水性盐溶液,包含磷酸氢钠,氯化钠,在某些情况下还包含氯化钾和磷酸二氢钾。
PBS缓冲液可以用于免疫组织化学染色
免疫组织化学是指通过使用与生物组织中的抗原特异性结合的抗体的原理来检测组织切片的细胞中的抗原,例如蛋白质的过程。 免疫荧光染色是第一种免疫组织化学染色方法。
当使用荧光染料与抗体偶联时,由于抗原-抗体结合反应,抗原变得可见。 当在荧光显微镜下通过激发特定波长的光将其激活时,就会发生此过程。
溶液的渗透压和离子浓度与人体的渗透压和离子浓度相互匹配,它们是等渗的关系。
PBS缓冲液的配方(详细见产品说明)
可以通过几种方法制备PBS,有多个公式, 其中一些不含钾,而另一些则不含钙或镁。该方法比较简单,适用于10倍PBS储液(0.1M)。 但是,您也可以制作1X的储备液,或从此10X配方开始将其稀释至1X。 整个配制过程大约需要10分钟,并且还提供了添加Tween的选项。
需要制作PBS缓冲液的材料:
磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠、称重和称重船、磁力搅拌器和搅拌棒、已校准的pH探针以及用于调节pH的合适溶液、1L容量瓶、补间20(可选)。
如何制作PBS缓冲液
非无水试剂可以代替,但您必须重新计算每种试剂的适当质量,以容纳添加的水分子。
PBS缓冲液的用途
- 磷酸盐缓冲盐水具有许多用途,因为它对大多数细胞均等渗且无毒。它可以用于稀释物质,通常用于冲洗细胞容器。 PBS可以在各种方法中用作稀释剂来干燥生物分子,因为其中的水分子将围绕物质(例如蛋白质)结构化。将其“干燥”并固定在固体表面上。
- pH值保持稳定且一致,以防止细胞破坏。
- 与该物质结合的水薄膜可防止变性或其他构象变化。碳酸盐缓冲液可用于相同目的,但效果较差。
- 在椭圆偏光法中测量蛋白质吸附时,PBS也可用于获取参考光谱。