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色谱柱的选择(实验简介,实验步骤,注意事项,所需试剂)

Release Time:2020-08-06

一、色谱柱的选择简介:
色谱柱的选择通常根据相似相容的原理进行色谱柱的选择,例如极性色谱柱对应极性物质,而色谱柱的规格如内径,柱长与固定液膜厚等参数,决定了这根色谱柱的分析能力。

二、色谱柱的选择实验步骤
(一).使用氨基柱
应该注意的是,氨基色谱柱的键合官能团氨基丙基比C18和C8色谱柱的键合官能团C18和C8更容易水解,因此,首先必须准备好其使用寿命短,尤其是当使用条件在相反的条件下。在反相条件下使用时,此时影响最大的因素是PH值范围,因此必须做好PH值范围的控制,PH值水解成反比,当PH值越低,水解的风险也就越。因此,在使用后以及准备长时间保存时,必须将氨基柱清洗并保存在纯净的水中。有机溶剂是良好的维护措施。
有一种情况是,当使用氨基色谱柱分析酸性物质(例如果汁糖分)时,酸性物质的存在意味着质子的存在,质子可能会使带有轻微负电荷的氨基官能团质子化,从而导致使用一段时间后,某些类型的分析物的保留特性发生了变化,或者柱效降低了。这时建议用5-10倍于含有0.5-1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液的色谱柱体积洗涤色谱柱,同时后续再分析此类酸性分析物时在流动相中添加少量氨水,例如0.1%。
3.使用氰基柱
正相色谱柱通常用于正相色谱,但也可以用于反相色谱(即,正相色谱柱使用反相条件)。当将其用于正相色谱法时,可以使用低极性流动相,例如正己烷,而当用于反相色谱法时,作用于甲醇或水的强极性流动相,因为疏水性相对较低,并且由于具有腈基,因此与ODS(反相)相比具有不同的选择性。当用作反相时,适用于分离在ODS上分离时间过长的组分。
(三).使用苯基柱
它属于正相色谱法和反相色谱法。它主要用于含苯基物质,属于一种特殊的色谱柱。当用于正相色谱时,可以使用低极性流动相,例如正己烷,请参阅相应的硅胶柱。当用于反相色谱时,可以使用强极性的甲醇或水的极性流动相,请参阅相应的C18柱。洗涤方法与氰基柱相同。
三、色谱柱的选择实验注意事项:
氨基柱氰基柱苯基柱清洗:在正相条件下使用的氨基柱应参考硅胶柱的清洗方法在反相条件下应参考C18清洗方法。
四、色谱柱的选择实验所需试剂清单:
序列 产品名 货号 CAS 备注
1 NH3 JT8652 1336-21-6  
2 乙腈 JY0313 75-05-8  
3 甲醇 JT25999 67-56-1  
4 无菌去离子水 HC1314    
以上为色谱柱的选择实验,实验请选用高质量试剂
 
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