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对流免疫电泳实战经验分享(实验介绍,实验所需材料,实验步骤,实验所需试剂)
Release Time：2020-07-24一.对流免疫电泳实验介绍
对流免疫电泳实验是一种基于扩散结合电泳技术建立的简单快速的实验方法。该方法可以在短时间内产生结果，因此可用于快速诊断，其灵敏度是双向扩散技术的10-15倍。
血清该蛋白质在PH8.6的条件下带负电，因此所有蛋白质都在电场的作用下移动到E极。但是由于抗体在这种pH条件下，该分子的负电荷微弱，分子量大，因而速度慢。更重要的是，抗体分子受电渗的影响很大，这意味着电渗大于其本身的机动性。
二.对流免疫电泳实验所需的材料
人血清，巴比妥酸盐缓冲液，琼脂，抗人免疫血清，阴性对照血清，生理盐水，电泳仪等。
三.对流免疫电泳实验的操作步骤
1.琼脂平板的制备可以根据需要选择大玻璃平板和小玻璃载玻片。大玻璃板需要约10毫升的琼脂，小玻璃片需要约3.5毫升。固化后打孔。该方法与琼脂扩散实验相同。
2.添加样品：在左孔中添加患者血清（原始血清和10倍稀释血清各占据一个孔），在右侧添加抗血清，每片均应有阳性对照。
3.电泳操作流程：在电泳槽高度的三分之二处添加0.05mPH8.6巴比妥酸盐缓冲液。请注意，两个水箱中的液位尽可能高。将带有样品的玻璃板放在电泳槽上，将抗原端连接到负极，将抗体端连接到正极过滤纸浸湿后作为盐桥，过滤纸与琼脂板连接，其长度为0.5厘米。以板宽度计算电流，以板的长度计算电压。要求电流量为2毫安/厘米，即大板为20毫安，小板为10毫安。电压为5伏/厘米。通电2小时后观察结果。
4.对流免疫电泳实验结果观察：在黑色背景上方，用多个角度的散射光观察。两口井之间有一条白色的沉淀线，这意味着阳性对照应该有一条清晰的白色沉淀线。如果是抗原，则两极微沉淀条不清楚，将其在37°C下放置数小时可增强沉淀条的清晰度。
四.对流免疫电泳实验所需试剂清单
| 序号 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | Barbital | DBK500928 | 57-44-3 | |
| 2 | 琼脂 | SW0006 | 9002-18-0 | |
| 3 | 巴比妥钠 | JP1281 | 144-02-5 |
