怎么使用DAPI进行染色
Release Time:2020-07-201. DAPI染色实验简介:
当使用DAPI与双链DNA结合染色时,荧光强度可以提高约20倍。如果与单链DNA结合,则不会增强荧光。 DAPI的化学名称为4,6-二mid基-2-苯基吲哚(4,6-二mid基-2-苯基吲哚)。 DAPI可以结合双链DNA插槽,尤其是AT碱基,并且还可以在DNA序列中插入少于3个连续的AT碱基对。当它与双链DNA结合时,荧光强度可以增加约20倍。如果与单链DNA结合使用,荧光不会增加。因此,DAPI染色法是一种简单,快速,灵敏的DNA检测方法。实验方法。尽管DAPI的荧光强度低于Hoechst,但其荧光稳定性优于Hoechst。其特异性高于溴化乙锭和碘化丙啶。
2. DAPI染色实验所需的材料:
(1)0.01mol / L PBS(pH7.0):取34ml 0.1mol / L NaH2PO4?H2O,66ml 0.1mol / L Na2HPO4、0.9g NaCl溶解于900ml二次蒸馏水; (2)DAPI储存溶液:将0.5mg DAPI溶于5ml PBS中,分装,并在低温下长时间保存; (3)DAPI工作液:用PBS稀释DAPI储存液至终浓度为0.1ug / ml。
3. DAPI染色实验操作步骤:
(1)将培养的单层细胞(未固定)或新鲜组织等冷冻切片,用PBS冲洗5分钟; (2)DAPI工作溶液在室温下染色5-20分钟(根据实验材料而定)(取决于染色结果); (3)PBS冲洗; (4)水溶性贴片,游离细胞也可以直接用含DAPI的PBS贴片; (5)荧光显微镜观察。
四、DAPI染色实验所需试剂清单
序号 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
1 | PBS缓冲液 | HC2031 | ||
2 | 磷酸氢二钠 | SS1345 | 7558-79-4 | |
3 | 无水磷酸二氢钠 | SS1337 | 7558-80-7 | |
4 | 氯化钠 | JT0001 | 7647-14-5 | |
5 | DAPI染色液 | HC0622 |