一、简单介绍
BCA与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂，混合在一起即成为苹果绿，即BCA工作试剂。在碱性条件下，BCA与蛋白质结合时，蛋白质将Cu2 +还原为Cu +，一个Cu +螯合二个BCA分子，工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物，最大光吸收强度与蛋白质浓度成正比。

二、实验目的
掌握BCA法测定蛋白质浓度的原理。
 

三，实验操作
标准曲线的绘制：取试管七支，编号，点击表操作：

四，实验中计算
（1）重新绘制标准曲线。
（2）以测定管吸光度值，查找标准曲线，求出待测血清中蛋白质浓度（g / L）。
（3）再从标准管中选择一管与测定管光密度相接近者，求出待测血清中蛋白质浓度（g / L）。

五，实验优缺点
（一）操作简单，快速，45分钟内完成测定，比经典的Lowary法快4倍且更加方便；
（二）准确灵敏，试剂稳定性好，BCA试剂的蛋白质测定范围是20-200μg/ ml，微量BCA测定范围在0.5-10μg/ ml。
（三）经济实用，除试管外，测定可在微板孔中就进行，大大节省样品和试剂用量；
（四）抗试剂干扰能力比较强，如去垢剂，尿素等均无影响
六，实验所需试剂和器材
器材：
7220型分光光度计、恒温水浴箱、中试管7支、枪式移液管
试剂：
试剂A：1％BCA二钠盐、2％无水碳酸钠、0.16％酒石酸钠、0.4％氢氧化钠、0.95％碳酸氢钠、混合调PH值至11.25。
2，试剂B：4％硫酸铜。
3，BCA工作液：试剂A 100ml ＋试剂B 2ml混合
4，蛋白质标准液：用结晶牛血清白蛋白根据其纯度用生理盐水配制成的1.5mg / ml的蛋白质标准液。（纯度可经凯氏定氮法测定蛋白质含量而确定）
此法测定蛋白质浓度，近些年被科研工作者广泛选用。目前BCA法的试剂盒市面有售。总之，虽然蛋白质含量的测定方法很多，但是，还没有一个完美的方法。在选择测定方法时，可根据实验要求和实验室条件决定。

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