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PI染色检测细胞周期实验
Release Time：2020-07-11PI即我们常用的碘化丙锭，他可以与细胞内的DNA和RNA进行结合，RNA的抑制剂将RNA消化后，通过流式细胞术检测到与DNA结合的PI的荧光强度可以直接反映出细胞内的DNA含量的多少。
一、实验步骤
1、离心收集细胞，弃上清，用预冷PBS洗细胞两次。
2、加入预冷70%乙醇，于4℃固定过夜，或-20℃长期固定。
3、细胞染色
离心收集细胞，以1mL的PBS洗细胞一次，加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭（PI），100ug/mL RNA酶， 0.2% 曲拉通X-100， 4℃避光孵育30分钟 。
4、流式分析
以标准程序用流式细胞仪检测，一般计数2-3万个细胞，结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。分析时，使用FL2-w和FL2-A显示，去除联体细胞。细胞周期流式后一般分为G0/G1,S,G2/M期三部份，如果有凋亡，在G0/G1期前面有个凋亡峰(也称sub-G0期),而如果分析时细胞窗口没设置好，可能在最前面还有细胞碎片峰。
二、实验所需材料
| 序号 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | PBS缓冲液 | HC2031 | ||
| 2 | 乙醇 | JT26000 | 64-17-5 | |
| 3 | 溴化乙锭 | SS1957 | 1239-45-8 | |
| 4 | 曲拉通X-100 | SS0049 | 9002-93-1 |
