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质粒DNA提取实验方法原理：
       碱裂解法是基于DNA变性和复性的差异来实现分离的目的。碱性使质粒DNA变性，然后将pH调节至中性以复性。复性是质粒DNA，但染色体DNA不会复性，并且缠结成网状物质，可通过离心除去。

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质粒DNA提取所需实验材料：
大肠杆菌
试剂盒
Tris-Hcl；EDTA；葡萄糖；NaOH；KAac；NaAc；异丙醇；溶菌酶；苯酚：氯仿；无水乙醇；LB培养基
仪器，耗材（吸头、离心管）
超净工作台、孵化器、摇床、恒温水浴、台式离心机、吸管、低温冰箱、冷冻真空干燥机、电泳法卧式电泳槽、紫外线灯。

序列	产品名	货号	备注
1	Tris-Hcl
2	EDTA二钠	SS0008-100g
3	无水葡萄糖	SC0001
4	NaOH
5	KAac	HC1535-500ml
6	NaAc	HC0005-500ml
7	异丙醇
8	溶菌酶	SS4099-1g
9	苯酚：氯仿
10	无水乙醇
11	LB培养基	HC1007-500ml
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质粒DNA提取实验步骤：
1.材料：大肠杆菌。
2.  仪器：超干净的工作台，孵化器，摇床，恒温水浴，台式离心机，吸管一套，低温冰箱，冷冻真空干燥机，电泳法，卧式电泳槽，紫外线观察者。
3.试剂：
（1）溶液I：25mM Tris-HCl（pH7.4），10mM EDTA（pH8.0），50mM葡萄糖，高压灭菌，并在4℃下保存；
（2）溶液II：现在使用0.2 M NaOH，1％SDS；
（3）溶液III：5 N KAc pH4.8，高压灭菌，在4℃下保存；
（4）3 M NaAc pH5.2，高压灭菌并在4℃下保存；
（5）异丙醇，溶菌酶（8 mg / ml），苯酚/氯仿，无水乙醇，70％乙醇，LB培养基，电泳试剂。

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二.实验操作步骤
1.细菌繁殖：LB培养基，2ml / 20ml，37℃，200rpm，摇动过夜；
2.离心10分钟，转速为5000 rpm，4°C；丢弃液体；
3.用预冷的TES缓冲液洗涤沉淀物（细胞），在4°C下以10 rpm，5 000 rpm离心10分钟，加入预冷的1 ml溶液I，并冰浴10分钟；
4.重悬，加入150ul溶菌酶母液，在室温下静置5分钟；
5.添加1.2ml的溶液II并在冰浴上保持5分钟；
6.加入0.9 ml预冷的乙酸钾，混合均匀，在4°C下以12 000 rpm离心10分钟；
7.加入1.5 ml异丙醇，并将其放在-20°C的冰箱中放置15分钟；
8.在4°C下以12 000 rpm离心10分钟；
9.取沉淀并将其悬浮在400 ul TE缓冲液中；
10.添加40ul 3M NaAc；
11.苯酚/氯仿，萃取，乙醇沉淀；
12.在4°C下以12 000 rpm离心10分钟；
13.取出沉淀物，将其冷冻干燥，然后重悬于50ul TE缓冲液中；
14.电泳检测提取的DNA的质量。

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