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如何配制LB培养基

Release Time:2020-07-01
       
       LB medium is the most commonly used medium in microbiology experiments. It is used to cultivate bacteria and other bacteria. It is divided into liquid phase or solid medium made by adding agar. Antibiotic-added LB medium can be used to select clones that host antibiotics.
       LB培养基,是微生物学实验中最常用的培养基,用于培养细菌等细菌,其分为液相LB培养基,琼脂制成的固态LB培养基。加入抗生素的LB培养基可用于筛选以抗生素为主机的克隆。
       一般LB培养基的名称被广泛称之为Luria-Bertani 培养基,根据该培养基的发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的解释,这个名字来源于英语的 lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基的主要成分:
序列 成分 货号 用量
1 胰蛋白胨(tryptone) SS2171 10g
2 酵母提取物(yeast extract)   5g
3 氯化钠(NaCl) JT0001 10g
4 琼脂粉 灰分ash ≤1.5%,Low gel strength(900-1000) SW0006 15-20g
5 琼脂粉 灰分ash ≤1.5%,Low gel strength(1200-1400) SW0007  

      备注:加双蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH至7.2,121℃灭菌30min
LB培养基的配制方法:
  (1)称量:分别称取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于烧杯中。
  (2)溶化:加入所需水量2/3的蒸馏水于烧杯中,用玻棒搅拌,使药品全部溶化。
  (3)调节pH:用1mol/L NaOH溶液调pH至7.2。
  (4)定容:将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。
  (5)加琼脂:加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。
  (6)分装、加塞、包扎。
  (7)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌约20min。
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