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一价铜离子探针 (CU-1探针,特异性探针) 是一种膜透性荧光染料。CU-1探针 对 Cu+ (一价铜离子) 具有亲和力,其亲和力在皮摩尔范围,对竞争细胞金属离子具有很高的选择性。CU-1 作为探针,可以选择性、灵敏地检测包括活细胞在内的生物样品中的铜 (I) 离子 (Cu+)。CU-1探针可用于癌症、心血管疾病、神经系统疾病等严重疾病的成像研究。激发波长为 543 nm,发射波长:Emission (Em)    576。
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中文别名 一价铜离子探针CU-1
英文别名 Cu+ fluorescent probe
CAS号
Inchi
InchiKey
分子式 Formula C30H50BF2N3S4
分子量 Molecular Weight 629.81
溶解度Solubility DMSO 中的溶解度 : 25 mg/mL
性状 固体粉末
储藏条件 Storage conditions 4°C, protect from light

一、使用指南:
A. 制备用于成像的试剂储备溶液:
1. 通过在每毫升 DMSO 溶剂中溶解 0.63 mg 固体 CS1,在 DMSO 中制备 1 mM CS1 储备溶液(MW 630 g/moL)。
B. 活细胞的 CU-1 标记:
1. 细胞成像实验需要培养 1-2 天。根据您的正常方案孵育细胞。
2. 在成像前一天,将细胞传代并置于涂有聚-L-赖氨酸(50 μg/mL)的 18 mm 玻璃盖玻片上。用于成像的贴壁细胞生长至 50-80% 融合。
3. 从培养箱中取出细胞,将一个盖玻片转移到含有 3 mL PBS 缓冲液的 35 毫米培养皿中。
4. 向培养皿中加入 15 μL 1 mM CU-1 原液,使染料最终浓度为 5 μM。充分混合。
(染料浓度越高,背景荧光水平越高)
5. 在 25 或 37℃ 的黑暗环境中孵育 5-20 分钟。
C. 对 CU-1 标记细胞进行成像。

二、一价铜离子探针(Cu﹢)的特异性结合原理:
1. 未结合 Cu﹢ 时:荧光淬灭状态
探针分子自由态下,存在两种关键光物理过程导致荧光微弱:
PET 效应主导:分子中的羟基(-OH)为电子给体(D),苯并噻唑母核为电子受体(A),基态时电子从羟基转移至母核,激发态电子无法有效跃迁回基态,能量以非辐射形式耗散(如热能),荧光被淬灭;
ESIPT 竞争:羟基与母核上的 N 原子形成分子内氢键,激发态时发生质子转移,形成酮式异构体,该过程同样会消耗激发态能量,进一步抑制荧光发射。
此时探针溶液呈微弱荧光或无荧光,仅表现出分子本身的紫外吸收特性。
2. 结合 Cu﹢ 后:荧光开启 / 增强状态
当体系中存在 Cu﹢ 时,探针通过 N、O 双配位位点 与 Cu﹢ 特异性螯合,形成 1:1 或 2:1 稳定络合物(根据取代基结构差异,配位比例略有不同),引发两大关键变化:
PET 效应阻断:Cu﹢ 作为电子受体,与探针的配位作用改变分子前线轨道能级分布,使羟基(电子给体)与母核(电子受体)之间的电子转移路径被切断,激发态电子无法再通过 PET 过程耗散;
ESIPT 过程抑制:配位作用破坏了分子内氢键网络,羟基的质子转移受阻,激发态电子只能通过 辐射跃迁 回到基态,释放特定波长的荧光;
络合物刚性增强:Cu﹢ 与探针的螯合使分子构象趋于稳定(刚性提升),减少了激发态分子的振动、旋转等非辐射弛豫过程,进一步提高荧光量子产率(ΦF)。
最终表现为:溶液在紫外灯照射下发出显著荧光(常见发射波长 450-550 nm,呈蓝色或绿色荧光),且荧光强度与 Cu﹢ 浓度在一定范围内呈线性相关,实现对 Cu﹢的定量检测。

三、基础光学指标

参数 关键判定 实用意义
激发Ex发射Em 典长波可见光近红外 避开细胞自发荧光,适配共聚焦活体仪
斯托克斯位移 >80nm(优) 低背景、无串色、信噪比拉高
摩尔消光系数ε 数值越高越好 吸光强,低功率光源即可激发
量子产率Φ 水相缓冲液优先高值 决定真实发光效率(最核心)
荧光亮度=ε×Φ 越大成像越清晰 弱光成像、减少光损伤
半峰宽FWHM 窄峰 多色并行成像,互不干扰
光稳定性 抗光漂白强 长时程活细胞追踪、反复扫图不淬灭
pH离子极性敏感 依用途定 靶向细胞器膜脂:敏感为优;通用探针:无漂移为优

、分子理化&靶向性能
分子量MW:低分子量→透膜快、毒性低、孵育时间短
LogP脂水分配系数:
线粒体:适度亲脂;溶酶体:亲水偏极性;胞质:平衡分布
水溶性:低水溶需DMSO助溶(注意细胞毒性);高水溶无析出
特异性:无交叉响应(不结合蛋白GSH杂离子)
动力学:秒级响应→适配活体动态抓拍
Kd线性范围LOD:决定定量精度、检测下限

五、细胞水平验证指标
透膜性:自发穿膜,无需转染破膜
共定位系数:PearsonR>0.7=靶向合格(顶刊配图标准)
毒性:CCK8/LDH低毒,支持长时间活细胞观测
胞内抗淬灭:慢漂白,连续拍摄不掉亮度
抗内源干扰:不惧血清、蛋白、谷胱甘肽
滞留性:抵抗P-gp外排,胞内留存久

六、动物活体成像
穿透深度:偏向NIR-I/NIR-II,深层组织显影
TBR靶背比:数值越高,肿瘤器官边界越清晰
代谢清除:肝肾快速代谢,降低背景残留
生物分布:靶组织富集、非靶脏器无堆积
体内稳定性:血液中不分解、非特异吸附少
体内光毒性:无额外ROS产生,安全成像

七、其他参数指标
开关比(Foldchange):响应倍数越高,灵敏度越强
可逆性:可逆=反复检测;不可逆=定点标记示踪
抗干扰性:排斥共存离子、生物小分子干扰
酶切效率:酶活探针核心,直接关联检测灵敏度



 
产品说明
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