LB营养琼脂

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LB 营养琼脂成分:
胰蛋白胨：提供氮源、氨基酸等营养物质，是细菌生长所需氮元素的重要来源。
酵母浸粉：富含维生素、氨基酸、核苷酸等，为细菌生长提供多种生长因子。
氯化钠：维持培养基的渗透压，使细菌细胞能够保持正常的生理状态。
琼脂：作为凝固剂，在高温下融化，冷却后凝固，使培养基形成固体状态，便于细菌在其表面生长形成单菌落。
LB 高盐营养琼脂配方：
胰蛋白胨 10.0g、酵母浸粉 5.0g、氯化钠 10.0g、琼脂 15.0g，pH 值通常调至 7.0±0.2（25℃）。
LB 低盐营养琼脂配方：
胰蛋白胨 10.0g、酵母浸粉 5.0g、氯化钠 5.0g、琼脂 15.0g，pH 值通常调至 7.0±0.2（25℃）。

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LB 营养琼脂用途:
大肠杆菌培养：用于发酵工程、基因工程和分子生物学中大肠杆菌的培养，适用于大肠杆菌的克隆、DNA 质粒生产和重组蛋白生产等。
一般细菌培养：用于培养多种其他微生物，如金黄色葡萄球菌、枯草杆菌等，是实验室常用的非选择性营养培养基。

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LB 营养琼脂 用法：
a.称取适量的 LB 营养琼脂粉末（如 40g），加入 1L 蒸馏水中。
b.加热至沸腾，同时搅拌，使粉末完全溶解。
c.将溶液在 121℃下高压灭菌 15 分钟，以杀灭杂菌。
d.冷却至 50℃左右，然后在无菌条件下倒入无菌培养皿中，待其凝固后即可使用。

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LB 营养琼脂质控和典型特征：
a.物理特征

检查项目	合格标准	不合格表现及原因
外观颜色	均匀的乳白色或淡黄色（不同批次颜色略有差别）	出现绿色、黑色、红色等异常颜色，可能是原料污染或灭菌不彻底
澄清度	融化后（未凝固前）溶液澄清透明，无肉眼可见的絮状物、颗粒或沉淀	浑浊、有未溶颗粒，可能是琼脂未完全融化或原料杂质过多
凝固性	冷却至室温（20-25℃）后 30 分钟内完全凝固，质地均匀、有弹性	凝固缓慢、不凝固或凝固后易碎裂，可能是琼脂添加量不足或灭菌时过度加热破坏琼脂结构
平板厚度	倒平板后（直径 90mm 培养皿）厚度均匀，约 3-4mm（对应倒液量 15-20mL）	厚度不均（边缘薄、中央厚），会导致局部营养浓度差异，影响菌落大小一致性

b.无菌性检查
检查目的：确认培养基制备过程中未引入杂菌（如细菌、霉菌），避免干扰后续培养结果。
检查方法：
取 3-5 个制备好的 LB 琼脂平板（未接种任何菌），按 “培养阶段” 的条件（如 36±1℃）倒置培养 18-24 小时（与目标菌培养条件一致）。
培养后观察平板表面，无任何菌落生长即为无菌性合格；若出现零星菌落或霉菌斑，说明制备过程（如倒平板时空气污染、培养皿未灭菌）存在问题，该批次培养基需废弃。

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实验注意事项：
1.实验前需戴好防护眼镜，穿戴防护服和口罩，佩戴手套，避免与皮肤接触。
2.实验过程中如遇到有毒或者刺激性物质及有害物质产生，必要时实验操作需要手套箱内完成以免对实验人员造成伤害。
3.取样品的移液枪头需及时更换，必要时为避免交叉污染尽可能选择滤芯吸头。
4.称量药品时选用称量纸，并无风处取药和称量以免扬撒，试剂的容器使用前务必确保干净，并消毒。
5.取药品时尽量采用多个药勺分别使用，使用后清洗干净。
6.实验后产生的废弃物需分类存储，并交于专业生物废气物处理公司处理，以免造成环境污染。
大规格定制：定制产品请将信息发送至sales@bio-fount.com。
Experimental considerations:
1. Wear protective glasses, protective clothing and masks, gloves, and avoid contact with the skin during the experiment.
2. The waste generated after the experiment needs to be stored separately, and handed over to a professional biological waste gas treatment company to avoid environmental pollution.