LB肉汤

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一、培养基核心成分及作用（按浓度排序）
成分               浓度（g/L）     功能
胰蛋白胨       10.0                主要碳源和氮源：由动物蛋白（如酪蛋白）经胰酶消化制成，含丰富氨基酸、短肽，为目标菌生长提供必需的氮元素、碳元素及生长因子，支持细菌大量繁殖。
酵母浸粉          5.0                   补充营养与生长因子：从酵母中提取，含 B 族维生素（如维生素 B1、B2）、核苷酸、小分子糖类等，可促进细菌代谢，尤其对营养需求稍高的菌株起 "辅助生长"作用。
氯化钠              5.0                   维持渗透压平衡：模拟细菌自然生长环境（如人体体液、环境水体）的渗透压，防止细菌因渗透压剧烈变化导致细胞破裂或脱水，保证菌体正常形态和生理功能。

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二、关键理化参数（培养条件）
pH 值：7.3 ± 0.2（中性偏碱）：该 pH 范围适配多数常见细菌（如大肠杆菌、沙门氏菌等肠道菌）的生长需求 —— 多数细菌适宜在中性或弱碱性环境中代谢，过酸或过碱会抑制酶活性，阻碍生长。
温度：25℃：属于 “中温培养”，适用于环境微生物（如土壤、水体中的细菌）或部分非致病性细菌培养；若需培养人体来源的致病菌（如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌），通常调整为 35-37℃（模拟人体体温）。

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三、培养基类型与适用场景
类型定位：属于营养培养基（Nutrient Medium）
特点是成分简单、营养全面，无选择性（不抑制杂菌）、无鉴别性（不能区分不同菌种），核心作用是 “通用型增殖”—— 让目标菌（或混合菌群）在适宜条件下大量生长，为后续的分离、鉴定（如生化试验、药敏试验）提供足够菌量。

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典型使用场景：
环境微生物检测：如水体、土壤中可培养细菌的计数或富集。
细菌纯培养：对已分离的单一菌种进行扩大培养，用于制备菌悬液、保存菌种。
基础生化试验前的菌体制备：为糖发酵、氧化酶试验等提供足量菌体

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LB肉汤使用方法

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一、LB 肉汤标准使用步骤
※ 称量与溶解
准确称取 LB 肉汤干粉（含胰蛋白胨、酵母浸粉、氯化钠等成分）20.0g，加入到装有1000ml 蒸馏水（或去离子水，避免杂质影响细菌生长）的洁净烧杯中。
置于加热设备（如电炉、磁力搅拌器）上，缓慢加热并搅拌，直至干粉完全溶解（溶液呈澄清透明状，无肉眼可见颗粒），避免局部过热导致成分碳化。
※ 分装操作：将溶解后的 LB 肉汤溶液，根据后续使用需求（如试管培养、三角瓶扩大培养）分装至无菌容器（如玻璃试管、锥形瓶）中。
※注 意事项：
若使用三角瓶，液体装量不宜超过瓶容积的 1/2（例如 250ml 三角瓶装液不超过 125ml），避免高压灭菌时液体沸腾溢出，同时为后续细菌培养（尤其是摇瓶培养）预留足够氧气空间。
分装后及时盖上合适的塞子（如硅胶塞、棉塞），并包裹牛皮纸或 parafilm 膜，防止灭菌后污染。
※ 高压灭菌（核心灭菌环节）
将分装好的 LB 肉汤放入高压蒸汽灭菌器中，设置灭菌参数：温度 121℃、压力 0.1MPa（1kg/cm²）、时间 15 分钟。
灭菌原理：121℃的饱和蒸汽可穿透微生物的细胞壁和细胞膜，破坏蛋白质、核酸等生物大分子结构，彻底杀灭培养基中可能存在的细菌、芽孢、真菌等微生物及孢子，避免杂菌污染。
灭菌后操作：待灭菌器压力降至 0MPa、温度降至室温后，缓慢打开排气阀，取出培养基，置于无菌环境（如超净工作台）中冷却至室温，即可备用。

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二、关键操作注意事项
※ 称量精度
需使用精度为 0.1g 的电子天平称量干粉，若称量偏差过大（如不足 20g），会导致培养基营养浓度不足，影响细菌生长速度；若过量，则可能因渗透压过高抑制菌体增殖。
※ 溶解细节
严禁直接将干粉倒入沸水中溶解，高温会使胰蛋白胨、酵母浸粉中的蛋白质变性凝固，形成不溶性沉淀，导致培养基营养失效。需从常温开始缓慢加热搅拌。
※ 灭菌
温度低于 121℃或时间短于 15 分钟：无法彻底杀灭耐热芽孢（如枯草芽孢杆菌芽孢），易导致后续培养时杂菌污染。
温度过高或时间过长：会破坏培养基中的 B 族维生素（来自酵母浸粉）、氨基酸等营养成分，降低培养基的营养效力，甚至产生有害物质抑制细菌生长。
※ 冷却与储存：灭菌后的 LB 肉汤需冷却至室温后再使用，若直接接入菌种，高温会杀死菌体；若暂不使用，可密封后置于 4℃冰箱冷藏保存，储存时间一般不超过 1 周，避免营养成分降解或二次污染。

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