BODIPY FL C5-神经酰胺

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BODIPY FL C5-神经酰胺（Golgi-Tracker Green）使用方法：
一、BODIPY FL C5-神经酰胺工作液的配制
1. 第一次使用本品，可将 BODIPY FL C5-神经酰胺( 0.5mM)根据单次用量分装，比如10µl/管。本品一管含30µl（总量：1mg），由于本身量微少，务必低速离心后再开盖，然后用低吸附枪头吸取母液，并分装-20℃冻存，避免反复冻融。
2. 吸取少量 BODIPY FL C5-神经酰胺 (0.5mM)按照1：100的比例用Golgi-Tracker稀释液来稀释，比如：取10µl BODIPY FL C5-神经酰胺 (0.5mM)加入到1ml BODIPY FL C5-神经酰胺 稀释液中，混匀后即为 BODIPY FL C5-神经酰胺 工作液，工作液请现配现用。
※【注意】：BODIPY FL C5-神经酰胺 的工作浓度可以根据实际情况进行适当调整，推荐的稀释比例调整范围为1:50~1:200。
二、活细胞高尔基体的荧光标记
1. 去除细胞培养液，用适量的溶液如：Hanks平衡盐溶液（含钙镁）（货号：HC1149-500ML）或其他缓冲液来洗涤生长在盖玻片上的细胞。
2. 去除洗涤液，加入新鲜配制的 BODIPY FL C5-神经酰胺 染色工作液，4℃孵育30min。
3. 吸走染色液，用冰浴预冷的细胞培养液洗涤细胞3次左右，换新鲜培养液37℃再孵育30min。
4. 用新鲜培养液再洗涤一次，随后用荧光显微镜进行观察。此时可观察到高尔基体呈明亮的强荧光染色，而细胞内的其他膜系统呈比较微弱的荧光染色。

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荧光图

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实验注意事项：
1.实验前需戴好防护眼镜，穿戴防护服和口罩，佩戴手套，避免与皮肤接触。
2.实验过程中如遇到有毒或者刺激性物质及有害物质产生，必要时实验操作需要手套箱内完成以免对实验人员造成伤害
3.实验后产生的废弃物需分类存储，并交于专业生物废气物处理公司处理，以免造成环境污染；
4.微量试剂，每次使用前需要离心数秒钟后使用，目的是使试剂充分沉降到管底。
5.荧光染料都存在淬灭问题，所以在储存过程中需避光，以减缓荧光淬灭。

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