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Cellstain- AO
NMR and HPLC COA下载 MSDS下载 - Names：
Cellstain- AO;细胞核染料
- CAS号：
65-61-2
MDL Number： MFCD00012660 - MF(分子式)： CHClN MW(分子量)： 301.81
- EINECS:Not available Reaxys Number:
- Pubchem ID: Brand:BIOFOUNT
| 货品编码 | 规格 | 纯度 | 价格 (¥) | 现价(¥) | 特价(¥) | 库存描述 | 数量 | 总计 (¥) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| SS2136-1g | 1g | 98% | ¥ 0.00 | ¥ 0.00 | 1-3days | ¥ 0.00 | ||
| SS2136-250mg | 250mg | 98% | ¥ 3200.00 | ¥ 3200.00 | 2600 | 1-3days | ¥ 0.00 | |
| SS2136-50mg | 50mg | 98% | ¥ 1100.00 | ¥ 1100.00 | 650 | 1-3days | ¥ 0.00 |
| 中文别名 | 65-61-2;吖啶橙;吖啶橙 盐酸盐;吖啶橙盐酸盐 |
| 英文别名 | Cellstain- AO;Acridine Orange hydrochloride;Acridine Orange hydrochloride;Acridine Orange;AO; |
| CAS号 | 65-61-2 |
| Inchi | InChI=1S/C17H19N3.ClH/c1-19(2)14-7-5-12-9-13-6-8-15(20(3)4)11-17(13)18-16(12)10-14;/h5-11H,1-4H3;1H |
| InchiKey | VSTHNGLPHBTRMB-UHFFFAOYSA-N |
| 分子式 Molecular Weight | CHClN |
| 分子量 Formula | 301.81 |
| 溶解度Solubility | 生物体外In Vitro:H2O50 mg/mL(165.67 mM;Need ultrasonic and warming)DMSO溶解度30 mg/mL(99.40 mM;Need ultrasonic) |
| 性状 | No data available |
| 储藏条件 Storage conditions | 4°C, sealed storage, away from moisture and light * In solvent溶液中 : -80°C, 6 months月; -20°C, 1 month月 (sealed storage, away from moisture and light) |
一、染色原理
Cellstain- AO（吖啶橙）是一种异染性荧光染料，其核心作用机制基于对核酸的选择性结合，通过荧光信号区分DNA和RNA的分布状态：
与双链DNA结合：
AO通过嵌入双链DNA的碱基对之间，形成复合物，在激发波长502 nm下发射绿色荧光（峰值为526 nm）。
与单链DNA/RNA结合：
通过静电吸引作用，AO与单链核酸（如RNA或变性的单链DNA）的磷酸基团结合，形成聚集结构，在激发波长460 nm下发射红色荧光（峰值为650 nm）。
细胞状态区分：
正常细胞：细胞膜完整，AO可穿透进入核内，DNA呈均匀黄绿色荧光，RNA为橙红色荧光。
凋亡细胞：染色质固缩或断裂为碎片，AO标记后显示致密浓染的黄绿色颗粒。
坏死细胞：膜完整性破坏，AO逸出导致荧光减弱或消失。
二、实验步骤
以下为基于Cellstain- AO的典型染色流程（适用于贴壁或悬浮细胞）：
1. 试剂准备
Cellstain- AO储存液：1 mg/mL（避光保存于4℃）。
工作液配制：按实验需求稀释至终浓度8.5–17 μg/mL（例如：取5 μL储存液加入95 μL PBS或染色缓冲液）。
染色缓冲液：pH 7.4的磷酸盐缓冲液（PBS），或按试剂盒说明配制（如1× AO Stain Buffer）。
2. 样本处理
细胞收集：
贴壁细胞：胰酶消化后离心（300×g，5 min），PBS洗涤2次。
悬浮细胞：直接离心收集。
细胞浓度调整至约1×10^6/mL。
固定（可选）：若需长期保存，用4%多聚甲醛或95%乙醇固定15分钟，随后PBS洗涤。
3. 染色操作
取95 μL细胞悬液，加入5 μL AO工作液（终浓度约10 μg/mL），轻柔混匀。
避光条件下室温孵育15–20分钟（或4℃避光孵育10分钟以增强特异性）。
离心去除未结合染料（300×g，5 min），PBS洗涤1次以降低背景信号。
4. 制片与观察
将细胞悬液滴加至载玻片，覆盖盖玻片。
使用荧光显微镜观察：
激发波长：488 nm（蓝光激发）。
发射滤光片：515 nm（绿色荧光）和650 nm（红色荧光）。
5. 结果分析
正常细胞：细胞核均匀黄绿色，胞质橙红色（RNA）。
早期凋亡细胞：核染色质浓缩呈致密黄绿色颗粒。
晚期凋亡/坏死细胞：荧光强度减弱或呈弥散橙红色（若联合EB染色）。
三、应用场景
细胞凋亡检测：通过荧光强度与分布区分凋亡阶段。
核酸分布研究：同时标记DNA（绿色）和RNA（红色）。
溶酶体功能分析：酸性环境下AO荧光变化可指示溶酶体活性。
四、注意事项
避光操作：AO对光敏感，需全程避光以避免荧光淬灭；
浓度控制：过高浓度可能导致非特异性结合，建议预实验优化；
联合染色：常与溴化乙锭（EB）双染，EB仅标记死细胞（橙红色），增强凋亡/坏死区分；
毒性防护：AO具潜在致癌性，需佩戴手套并在通风橱操作；
储存条件：原液避光保存于4℃，稀释后工作液建议现用现配。
Cellstain- AO吖啶橙(MSDS,65-61-2)(65-61-2)实验注意事项：
1.实验前需戴好防护眼镜，穿戴防护服和口罩，佩戴手套，避免与皮肤接触。
2.实验过程中如遇到有毒或者刺激性物质及有害物质产生，必要时实验操作需要手套箱内完成以免对实验人员造成伤害。
3.取样品的移液枪头需及时更换，必要时为避免交叉污染尽可能选择滤芯吸头。
4.称量药品时选用称量纸，并无风处取药和称量以免扬撒，试剂的容器使用前务必确保干净，并消毒。
5.取药品时尽量采用多个药勺分别使用，使用后清洗干净后，烘干消毒存放。
6.实验后产生的废弃物需分类存储，并交于专业生物废气物处理公司处理，以免造成环境污染。
Experimental considerations:
1. Wear protective glasses, protective clothing and masks, gloves, and avoid contact with the skin during the experiment.
2. The waste generated after the experiment needs to be stored separately, and handed over to a professional biological waste gas treatment company to avoid environmental pollution.
| 产品说明 | Cellstain- AO- 吖啶橙 (AO) 与双链 DNA 形成复合物，发出绿色荧光。 AO 还与单链 DNA 或 RNA 形成复合物以发出红色荧光。 |
| Introduction | Acridine orange (AO) forms a complex with double-stranded DNA to emit green fluorescence. |
| Application1 | |
| Application2 | |
| Application3 |
| 警示图 | |
| 危险性 | warning |
| 危险性警示 | No data available |
| 安全声明 | H303吞入可能有害+H313皮肤接触可能有害+H333吸入可能对身体有害 |
| 安全防护 | P264处理后彻底清洗+P280戴防护手套/穿防护服/戴防护眼罩/戴防护面具+P305如果进入眼睛+P351用水小心冲洗几分钟+P338取出隐形眼镜（如果有）并且易于操作,继续冲洗+P337如果眼睛刺激持续+P313获得医疗建议/护理 |
| 备注 | 实验过程中防止吸入、食入，做好安全防护 |
| 1. McMaster GK, et al. Analysis of single- and double-stranded nucleic acids on polyacrylamide and agarosegels by using glyoxal and acridine orange. Proc Natl Acad Sci U S A. 1977 Nov;74(11):4835-8. |
| 2. Chemoresistance to concanamycin A1 in human oral squamous cell carcinoma is attenuated by an HDAC inhibitor partly via suppression of Bcl-2 expression.Kiyoshima et al.PLoS ONE, 2013;8:80998 |
| 3. Analysis of single and double stranded nucleic acids on polyacrylamide and agarose gels by using glyoxal and acridine orange.McMaster et al.Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1977;74:4835 |
| 4. Rapid communication: oxidative stress induces apoptosis in embryonic cortical neurons.Ratan et al.J.Neurobiol., 2008;62:376 |
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