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钙荧光白试剂
NMR and HPLC COA下载 MSDS下载 - Names：
Calcofluor white; CFw
- CAS号：
MDL Number： - MF(分子式)： C28H20Na2O6S2 MW(分子量)： 562.56
- EINECS: Reaxys Number:
- Pubchem ID: Brand:biofount
钙荧光白（CalcofluorWhite，CFW）是一种广泛应用于生物学和微生物学的荧光染料，其染色原理主要基于其与特定多糖的结合及荧光发射特性。主要用于检测细胞壁中的纤维素、几丁质等β-葡聚糖结构，广泛应用于真菌、植物细胞或某些微生物的研究。
| 货品编码 | 规格 | 纯度 | 价格 (¥) | 现价(¥) | 特价(¥) | 库存描述 | 数量 | 总计 (¥) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| JT17504-100g | 100g | >97%(HPLC) | ¥ 812.00 | ¥ 812.00 | 3-5days | ¥ 0.00 | ||
| JT17504-25g | 25g | >97%(HPLC) | ¥ 350.00 | ¥ 350.00 | 3-5days | ¥ 0.00 |
| 中文别名 | 钙荧光白试剂,荧光增白剂 4BK |
| 英文别名 | CFw |
| CAS号 | |
| Inchi | |
| InchiKey | |
| 分子式 Molecular Weight | C28H20Na2O6S2 |
| 分子量 Formula | 562.56 |
| 溶解度Solubility | 可溶于水 |
| 性状 | 固体颗粒或粉末 |
| 储藏条件 Storage conditions | 室温，密封，干燥 |
以下是其染色原理的详细解析：
一、化学结构与作用机制
1.化学性质
CFW是一种非特异性荧光增亮剂，化学结构包含共轭苯环和氨基基团，形成平面分子结构。这种结构使其能够通过π-π堆叠作用与目标多糖结合。
2.结合目标分子
特异性结合对象：
β-1,4糖苷键：CFW特异性结合含有β-1,4糖苷键的多糖，如：
纤维素（植物细胞壁的主要成分）。
壳多糖（几丁质，真菌和酵母细胞壁的主要成分）。
对α-糖苷键（如淀粉）无结合能力，因此具有一定的选择性。
3.荧光增强效应
当CFW与目标多糖结合时，其分子构象被固定为平面堆叠状态，导致荧光量子产率显著提高。
激发与发射波长：
激发波长：约355nm（紫外光）。
发射波长：约440nm（蓝绿色荧光）。
原理：CFW吸收紫外光后，激发的电子跃迁返回基态时，将能量以蓝绿色荧光形式释放。
二、染色原理的核心步骤
染色原理
1.染料与多糖的结合
结合过程：CFW通过氢键和范德华力与多糖的β-1,4糖苷键结合，形成线性或分支结构的复合物。
纤维素：CFW沿纤维素微纤丝排列，增强荧光信号。
壳多糖：与真菌细胞壁的壳多糖结合，突出细胞壁结构。
2.荧光信号的产生
荧光强度与多糖含量相关：
多糖含量越高（如细胞壁增厚或真菌繁殖活跃），CFW结合量越多，荧光信号越强。
1. 样品制备
固定：使用4%多聚甲醛（溶于PBS）室温固定细胞或组织15-30分钟。
透化（可选）：若样品较厚或细胞壁致密，用0.1% Triton X-100处理10分钟以增强通透性。
洗涤：PBS漂洗3次，每次5分钟，去除残留固定剂。
2. 染色液配制
储存液：将CFW粉末溶于蒸馏水或PBS，配成1%浓度（如10 mg/mL），避光保存于-20℃。
工作液：临用前稀释至0.1%浓度（如1:10用PBS稀释）。
3. 染色过程
孵育：将CFW工作液覆盖样品，避光室温孵育15-30分钟。
洗涤：PBS洗涤3次，每次5分钟，减少背景荧光。
4. 封片与观察
封片：滴加抗荧光淬灭剂（如含DAPI的封片剂），加盖玻片。
观察：荧光显微镜下使用紫外/蓝光激发（激发波长355nm，发射波长433nm），DAPI通道可同步观察细胞核。
三、应用场景与技术细节
1.主要应用领域
植物细胞壁研究：
检测植物细胞壁的生成变化，用于原生质体细胞的鉴定。
石蜡切片染色后，纤维素结构在紫外光下呈现明亮荧光。
真菌/酵母检测：
快速鉴定组织或液体样本中的真菌污染（如临床样本、环境样本），细胞壁荧光强度与菌量相关。
寄生虫检测：
如棘阿米巴包囊、微孢子虫孢子等，其细胞壁或囊壁在CFW染色后发出荧光。
2.染色操作关键点
避光操作：CFW对光敏感，染色液需避光保存（-20℃或4℃），实验步骤需在暗室进行。
固定与清洗：
植物组织需用甲醛-乙醇固定液（FAA）预处理。
多次离心清洗以去除未结合的染料，减少背景干扰。
激发光条件：
需配备紫外光源（如355nm滤光片）的荧光显微镜或分光光度仪。
四、注意事项
1.毒性与防护：
CFW具有细胞毒性，操作时需戴手套，避免接触皮肤或吸入粉尘。
2.染料稳定性：
长时间光照或反复冻融会降低染色效果，建议分装保存并避免反复使用母液。
3.背景干扰控制：
对于复杂样本（如组织切片），需优化染色时间（通常1-5分钟）和染料浓度，或添加伊文思蓝减少非特异性背景。
五、关键参数与优化
六、知识库案例支持
1.植物细胞壁检测：
通过离心清洗步骤去除未结合染料，确保仅细胞壁荧光被观察。
2.真菌定量检测：
在荧光分光光度仪中，激发波长355nm下，荧光强度与真菌细胞量呈线性关系。
3.临床样本检测：
氢氧化钾（KOH）预处理溶解组织，CFW染色后可清晰显示真菌孢子和寄生虫结构。
一、化学结构与作用机制
1.化学性质
CFW是一种非特异性荧光增亮剂，化学结构包含共轭苯环和氨基基团，形成平面分子结构。这种结构使其能够通过π-π堆叠作用与目标多糖结合。
2.结合目标分子
特异性结合对象：
β-1,4糖苷键：CFW特异性结合含有β-1,4糖苷键的多糖，如：
纤维素（植物细胞壁的主要成分）。
壳多糖（几丁质，真菌和酵母细胞壁的主要成分）。
对α-糖苷键（如淀粉）无结合能力，因此具有一定的选择性。
3.荧光增强效应
当CFW与目标多糖结合时，其分子构象被固定为平面堆叠状态，导致荧光量子产率显著提高。
激发与发射波长：
激发波长：约355nm（紫外光）。
发射波长：约440nm（蓝绿色荧光）。
原理：CFW吸收紫外光后，激发的电子跃迁返回基态时，将能量以蓝绿色荧光形式释放。
二、染色原理的核心步骤
染色原理
1.染料与多糖的结合
结合过程：CFW通过氢键和范德华力与多糖的β-1,4糖苷键结合，形成线性或分支结构的复合物。
纤维素：CFW沿纤维素微纤丝排列，增强荧光信号。
壳多糖：与真菌细胞壁的壳多糖结合，突出细胞壁结构。
2.荧光信号的产生
荧光强度与多糖含量相关：
多糖含量越高（如细胞壁增厚或真菌繁殖活跃），CFW结合量越多，荧光信号越强。
1. 样品制备
固定：使用4%多聚甲醛（溶于PBS）室温固定细胞或组织15-30分钟。
透化（可选）：若样品较厚或细胞壁致密，用0.1% Triton X-100处理10分钟以增强通透性。
洗涤：PBS漂洗3次，每次5分钟，去除残留固定剂。
2. 染色液配制
储存液：将CFW粉末溶于蒸馏水或PBS，配成1%浓度（如10 mg/mL），避光保存于-20℃。
工作液：临用前稀释至0.1%浓度（如1:10用PBS稀释）。
3. 染色过程
孵育：将CFW工作液覆盖样品，避光室温孵育15-30分钟。
洗涤：PBS洗涤3次，每次5分钟，减少背景荧光。
4. 封片与观察
封片：滴加抗荧光淬灭剂（如含DAPI的封片剂），加盖玻片。
观察：荧光显微镜下使用紫外/蓝光激发（激发波长355nm，发射波长433nm），DAPI通道可同步观察细胞核。
三、应用场景与技术细节
1.主要应用领域
植物细胞壁研究：
检测植物细胞壁的生成变化，用于原生质体细胞的鉴定。
石蜡切片染色后，纤维素结构在紫外光下呈现明亮荧光。
真菌/酵母检测：
快速鉴定组织或液体样本中的真菌污染（如临床样本、环境样本），细胞壁荧光强度与菌量相关。
寄生虫检测：
如棘阿米巴包囊、微孢子虫孢子等，其细胞壁或囊壁在CFW染色后发出荧光。
2.染色操作关键点
避光操作：CFW对光敏感，染色液需避光保存（-20℃或4℃），实验步骤需在暗室进行。
固定与清洗：
植物组织需用甲醛-乙醇固定液（FAA）预处理。
多次离心清洗以去除未结合的染料，减少背景干扰。
激发光条件：
需配备紫外光源（如355nm滤光片）的荧光显微镜或分光光度仪。
四、注意事项
1.毒性与防护：
CFW具有细胞毒性，操作时需戴手套，避免接触皮肤或吸入粉尘。
2.染料稳定性：
长时间光照或反复冻融会降低染色效果，建议分装保存并避免反复使用母液。
3.背景干扰控制：
对于复杂样本（如组织切片），需优化染色时间（通常1-5分钟）和染料浓度，或添加伊文思蓝减少非特异性背景。
五、关键参数与优化
浓度：0.01%-0.1% CFW，过高易导致背景高。
时间：15-30分钟，过长可能增加非特异性结合。
温度：室温或37℃（根据样品类型调整）。
六、知识库案例支持
1.植物细胞壁检测：
通过离心清洗步骤去除未结合染料，确保仅细胞壁荧光被观察。
2.真菌定量检测：
在荧光分光光度仪中，激发波长355nm下，荧光强度与真菌细胞量呈线性关系。
3.临床样本检测：
氢氧化钾（KOH）预处理溶解组织，CFW染色后可清晰显示真菌孢子和寄生虫结构。
| 产品说明 | |
| Introduction | |
| Application1 | |
| Application2 | |
| Application3 |
| Darken, M. 1961.Science.133:1704-1705.Hageage, G.J. and B.J.Harrington.1984.Lab.Med.15:109-112. |
| Baselski, V.S. and M.K.Robison.1989.Am. Clin.Lab.8:36-37. |
| Wilhelmus, K.R., M.S.Osato, R.L.Font, N.M.Robinson, and D.B.Jones.1986.Arch.Opthamol.104:1309-1312. |
| Weber, R., R.T.Bryan, D.A.Schwartz, and R.L.Owen.1994.Clin.Microbiol.Rev. 7:426-461. |
| Al-Doory, Y., R.J.Yankey, and M.L.Elgart.1985.Lab.Mgment.23:63-68. |
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