如何计算RNA浓度?
Release Time:2019-11-18 通过测量RNA样品对紫外线(UV)的吸光度来定量,纳滴分光光度计只会使用一到两微升样品,您可以回收这些样品,当然其他分光光度计需要更大的样本。 在1厘米长的光路中,波长为260nm的紫外线在核苷酸处的消光系数为20。基于消光系数,在相同条件下40μg/ ml RNA的吸光度为1。 采用此方法,您可以计算RNA样品的浓度。

如有必要,对样品进行稀释。 微量比色皿的标准稀释度为1:40。 通过将2µL RNA样品加入78µL无菌水中进行稀释。
遵循特定分光光度计的协议,使用空白物校准机器,然后在260nm的UV波长下确定样品的光密度。
将样品的吸光度乘以稀释倍数乘以40μgRNA / mL。 公式为:“ RNA浓度(µg / ml)=(OD260)x(稀释因子)x(40µg RNA / ml)/(1 OD260单位)”(Hofstra.edu)例如:如果您将样品稀释为 1:40,您的吸光度读数为0.08,则应乘以0.08 x 40 x 40 = 128 µg / ml = 0.13 µg /μL
通过在280nm紫外波长下获取另一个吸光度读数来确定样品的纯度。 OD 260 / OD 280的比率将指示您的样品是否被蛋白质或苯酚污染,以及在什么水平上被蛋白质或苯酚污染。 1.8到2.0的结果表明RNA品质高。

如有必要,对样品进行稀释。 微量比色皿的标准稀释度为1:40。 通过将2µL RNA样品加入78µL无菌水中进行稀释。
遵循特定分光光度计的协议,使用空白物校准机器,然后在260nm的UV波长下确定样品的光密度。
将样品的吸光度乘以稀释倍数乘以40μgRNA / mL。 公式为:“ RNA浓度(µg / ml)=(OD260)x(稀释因子)x(40µg RNA / ml)/(1 OD260单位)”(Hofstra.edu)例如:如果您将样品稀释为 1:40,您的吸光度读数为0.08,则应乘以0.08 x 40 x 40 = 128 µg / ml = 0.13 µg /μL
通过在280nm紫外波长下获取另一个吸光度读数来确定样品的纯度。 OD 260 / OD 280的比率将指示您的样品是否被蛋白质或苯酚污染,以及在什么水平上被蛋白质或苯酚污染。 1.8到2.0的结果表明RNA品质高。