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巴斯德人体观察实验
Release Time：2020-07-16一、巴斯德人体观察实验简介：
※ 实验目的
1.掌握人体x体（巴氏体）载玻片的制备方法
2.观察并确定巴氏体的形态特征和位置，识别个人的性别。
※ 实验原理
Pap体也称为X体：正常雌性，位于相间细胞核中，靠近核膜的内缘，大小约为1?1.5 um，呈三角形或椭圆形，数量为x染色体数减一， Pap体是由于女性X染色体之一的失活而形成的。
里昂的剂量理论说，女人有两个X染色体，但是表达的大多数遗传物质与只有一个X染色体的男人一样多。这是因为只有女性X染色体中的一条保持活跃，而另一条则复制较晚且没有活性。灭活的染色体在形态上是异染色体的，即DNA螺旋被紧紧地压紧，并且染色深而密，称为巴氏体。
二、巴斯德人体观察实验所需材料及试剂：
口腔粘膜细胞，发根鞘细胞显微镜，载玻片，盖玻片，牙签，移液器（甲醇：冰醋酸= 3：1），生理盐水，苯酚洋红染色
三、巴斯德人体观察实验步骤
1）材质
口腔粘膜细胞：对象用清水漱口几次，用干净的牙签刮除女性口腔内的粘膜，原位刮擦2至3次，第一次丢弃，然后第二次和第三次清洁幻灯片。
毛根细胞：提取具有毛囊（约2厘米）的女性头发，并将其插入载玻片上。
2）固定
在离心管中离心物料（口腔粘膜细胞），首先以2000 rpm离心20分钟，弃去上清液，加入新固定的固定液（甲醇：冰醋酸= 3：1），在37°C下静置30分钟，然后以1000 rpm离心。15分钟后弃去上清液，加入1ml固定液（甲醇：冰醋酸= 3：1）制成细胞悬液，将其放在载玻片上，将溶液（95％乙醇：乙醚= 1：1）固定1小时，然后风干。
3）染整
将一滴细胞悬液固定在载玻片上，固定20分钟，用蒸馏水清洗2至3分钟，在37℃水浴中用1N盐酸洗涤20分钟，风干，加入1至2滴染料溶液20至30分钟（请勿干燥），用水洗涤以除去染料溶液即可干燥。
直接涂抹：滴加染色液，室温20?30min（请勿干燥），盖上盖玻片并按。
毛细胞：拉出毛干，直接向毛囊细胞中加入5N盐酸，处理5分钟，吸去盐酸，加入染色液，染色20分钟，加盖玻片，然后按。
五，镜检
在高放大率镜头或油镜下观察（子宫颈）
四、实验所需试剂清单：
| 1 | 甲醇 | JT25999 | |
| 2 | 36%乙酸 | JT11990 | |
| 3 | 生理盐水 | HC0894 | |
| 4 | 苯酚 | JT24025 |
