如何使FISH达到最佳效果
Release Time:2020-07-14一、实验原理
二、样本的老化(目的是为了使FISH达到最佳效果)
1. 将样本片子放入2×SSC 37℃1小时
2. 将片子放入新制的胃蛋白酶工作液中(20ul 10%胃蛋白酶溶液中加入40ml0.01NHCl)37℃13分钟
3. 用磷酸盐平衡液(PBS)室温下清洗5分钟
4. 将片子放入快速固定液(0.95%甲醛:1ml的37%甲醛,0.18gMgCl2和39ml的PBS,4℃保存,一个月内使用)室温5分钟
5. 在室温下用PBS清洗5分钟
6. 晾干片子。为了加速晾干可以用带棉塞的巴氏移液管吹打玻片
7. 将片子浸泡在70%的乙醇中。用乙醇冲洗1分钟
8. 从70%乙醇中取出,依次放入85%、100%乙醇中重复以上步骤
9. 根据需要降解片子
三、实验所需试剂和耗材:
序列 | 产品名 | 货号 | CAS号 | 备注 |
1 | 胃蛋白酶 | HC0767 | ||
2 | MgCl2 | JT2113 | 7786-30-3 | |
3 | 乙醇 | CCF12679 | 127852-29-3 | |
4 | FT-200 | 200ul黄吸头 | ||
5 | F-EP020 | 2ml圆底连盖离心 |