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Hoechst 33258染色实验(原理,介绍,步骤,所需试剂)
Release Time：2020-07-09一、Hoechst 33258染色实验原理
Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌人性荧光染料。它们在活细胞中 DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。
活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中 摄取该染料。从而使细胞核着色。故又把此类染料称为DNA探针。Hoechst 33342和Hoechst 33258均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechsr-DNA的激发和发射波长分别550nm和460nm。在荧光显微镜紫外光激发时，Hoechst-DNA发出亮蓝色荧光。
二、Hoechst 33258染色实验所需溶液的配制：
(1)Hoechst 33258储存液
Hoechst 33258 lmg
0．01mol／LPBS(pH 7．4) 5ml
(2)Hoechst 33258工作液(终浓度为0．5ug／ml)
Hoechst 33258浓缩液 125ul
0．01mol／LPBS(pH 7．4) 50ml
三、Hoechst 33258染色实验操作步骤
(1)细胞悬液或培养单层细胞等标本，用醋酸―乙醇或Carnoy固定液固定；
(2)0．01mol／LPBS漂洗5分钟；
(3)Hoechst 33258工作液染色，室温15分钟；
(4)0．01mol／LPBS漂洗3次，每次5分钟；
(5)用甘油与PBS比例为1：9的混合液或水溶性封片剂封片，荧光显微镜观察。
结果：该染料为DNA的特异性荧光探针，细胞核呈亮蓝色荧光
四、Hoechst 33258染色实验所需试剂
| 序号 | 产品名 | 货号 | CAS | 备注 |
| 1 | PBS缓冲液 | HC2031 | ||
| 2 | 乙醇 | JT26000 | 64-17-5 | |
| 3 | 醋酸 | JT11990 | 64-19-7 | |
| 4 | 甘油 | JT26018 | 56-81-5 |
