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支原体去除剂的使用方法,工作浓度,对细胞有影响吗?

Release Time:2022-10-13

支原体去除剂的工作浓度:
1. 将支原体清除剂添加到被支原体污染的细胞培养物中,浓度建议为5µg/ml,并培养1周;
2. 只有当推荐浓度对去除支原体无效时,才能将支原体去除剂浓度提高至10µg/ml;
3. 对于培养基更换或培养物转移(传代),使用含有相同浓度支原体清除剂的培养基;
4. 在不使用支原体清除剂的情况下转移细胞培养物数次,并确认污染支原体没有再生。
支原体去除剂产品HCQ001000


支原体清除剂注意事项(细胞影响):

1. 如果不能去除血清或胰蛋白酶中的支原体,可以将浓度为5µg/ml的支原体清除剂添加到培养基中,以防止接触这些产品的细胞培养物受到污染;
2. 支原体清除剂自发货之日起保质期长达5年,在室温下也很稳定,但应避光以防分解;
3. 支原体清除剂的细胞毒性较低,但是,当用支原体去除剂处理时,高度受支原体污染的细胞培养物可能会表现出细胞特性的改变或对细胞毒性抗生素的敏感性,因此,在这些情况下,建议在处理后检查预期的细胞特性。
支原体清除剂案例数据
下表显示感染水平、细胞类型和支原体菌株可能会影响特定结果。我们鼓励研究人员将此数据作为有用的指南,以指示其特定细胞系和支原体菌株所需的有效支原体清除剂浓度。
支原体清除效果-自发性感染
MRA浓度 (ug/ml) 天数
    0 7 14 21
Human-derived cell-A 3.9 + - - -
  2 + - - -
  1 + - + +
  0 + + + +
Human-derived cell-B 7.8 + - - -
  3.9 + - - -
  2 + - - -
  1 + + + +
  0 + + + +
(+)=支原体阳性,(-)=支形体阴性,(天*)=培养阶段的支原体状态(天)。
参考文献:

1. Molla Kazemiha V. et al. 2011. Efficiency of Plasmocin on various mammalian cell lines infected by mollicutes in comparison with commonly used antibiotics in cell cultures: a local experience. Cytotechnology. Dec; 63(6):609-20.
2. Uphoff C. C. et al., 2012. Treatment of mycoplasma contamination in cell cultures with Plasmocin. J Biomed Biotechnol. 2012:267678.
3. Rongvaux A. et al., 2014. Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model. Nat Biotechnol. 32(4):364-72.
4. Baronti C. et al., 2013. Mycoplasma removal: simple curative methods for viral supernatants. J Virol Methods. 187(2):234-7.
5. Deng F. et al. 2012. Generation of induced pluripotent stem cells from human Tenon's capsule fibroblasts. Mol Vis. 18:2871-81.
6. Romorini L. et al, 2013. Effect of antibiotics against Mycoplasma sp. on human embryonic stem cells undifferentiated status, pluripotency, cell viability and growth. PLoS One. 7. Nakai, N. et al. (2000). Detection and elimination of contaminating microorganism
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