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AEBSF介绍：
AEBSF是一种不可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂。AEBSF已被证明抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、纤溶酶、激肽释放酶和凝血酶。它通过酶活性部位的酰化来抑制。作为PMSF和DFP的替代品，AEBSF具有更低的毒性、更好的水溶性和更好的水溶液稳定性。AEBSF已用于细胞培养，浓度高达0.25mM。水溶液在pH值5-6之间稳定；pH 7.5以上的有限稳定性。

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AEBSF的优点
※ AEBSF已被证明抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、纤溶酶-激肽释放酶和凝血酶。作为PMSF和 DFP替代品，AEBSF具有更低的毒性、更好的水溶性和更好的水溶液稳定性。
※ 苯基甲烷磺酰氟（PMSF）和二异丙基氟磷酸盐（DFP）的缓蚀常数相似。

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常用蛋白酶抑制剂：
AEBSF、抑肽酶、PMSF、EDTA

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AEBSF案例：

丝氨酸蛋白酶抑制剂AEBSF阻断DNA损伤诱导的细胞凋亡，但不阻断TNFa触发的细胞凋亡。（a）添加Etoposide (足叶乙甙)后在指定时间点采集的IGRmyc-3细胞的全细胞裂解物的蛋白质印迹。细胞在没有或存在10mm Z-VAD-FMK或400mm AEBSF的情况下处理。上部用识别全长和裂解PARP的抗体培养，下部用裂解caspase-3的抗体培养。标记p20和p17亚单位。（b）如图所示，用8 Gy照射IGRmyc-3细胞或用TNF a处理。通过Western blotting测定全长PARP（b）和裂解PARP（v）。（c）使用底物DEVD-AFC测定DEVDase活性。左部分代表了三个独立的实验，即在指定的时间段内用足叶乙甙处理IGRmyc-3细胞，无论是否预处理400 m m AEBSF。右侧代表用TNF a处理16小时的IGRmyc-3细胞，无需预处理，或用10 m m zVAD–fmk或400 m m AEBSF预处理。该图至少可以代表两个独立的实验。（d）如图所示，在AEBSF(mm）和/或10 mm Z-VAD-FMK浓度增加的情况下，IGRmyc-3细胞未经处理或用足叶乙甙处理24或32小时。24小时和32小时PI阳性未处理细胞的百分比分别为17%和14%。从相应的 足叶乙甙 处理样品中减去在没有足叶乙苷的情况下培养的PI阳性细胞的背景百分比。（e）在不存在或存在所示抑制剂的情况下，用 足叶乙甙 处理IGRmyc细胞。3小时后，刷新培养基和抑制剂，培养细胞1周。通过Giemsa溶液染色观察细胞。左面板显示了在六孔板中培养的细胞的照片。右边的面板显示了放大50倍的相同细胞培养物的显微照片

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