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5种常用DNA染液

Release Time:2019-11-26
     在许多选择中,这五个生物染料中是最常见的,首先是使用最广泛的溴化乙锭。 在进行此过程时,不仅要了解污渍之间的差异,而且要了解固有的健康风险,这一点很重要。
  1. 溴化乙锭
溴化乙锭可能是用于可视化DNA的最著名的染料。 它可以用于凝胶混合物,电泳缓冲液中,或在电泳后对凝胶染色。
染料的分子附着在DNA链上,并在紫外光下发出荧光,向您确切显示条带在凝胶中的位置。 尽管有其优点,但不利之处在于溴化乙锭是一种潜在的致癌物,因此必须谨慎处理。
  1. SYBR Gold
SYBR Gold染料可用于对双链或单链DNA染色或对RNA染色。 SYBR Gold作为溴化乙锭的首批替代品之一进入市场,并被认为更加敏感。
一旦与核酸结合,该染料就会表现出1000倍的更大的UV荧光增强。 然后它会渗透到厚而高百分比的琼脂糖凝胶中,并可以用于甲醛凝胶中。
由于未结合分子的荧光非常低,因此不需要脱色。 SYBR Gold推出以来,持有许可证的分子探针还开发并销售了SYBR Safe和SYBR Green,它们是溴化乙锭的更安全替代品。
  1. SYBR Green
SYBR Green I和II染色剂(再次由Molecular Probes销售)针对不同目的进行了优化。 由于它们与DNA结合,因此仍被认为是潜在的诱变剂,因此,应谨慎处理。
SYBR Green I对双链DNA敏感,而SYBR Green II最适合与单链DNA或RNA结合使用。 像流行的溴化乙锭染料一样,这些高度敏感的染料在紫外线下会发出荧光。

推荐将SYBR Green I和II与“ 254 nm落射照明宝丽来667黑白胶片和SYBR Green凝胶染色照相滤光片”配合使用,以实现每100 pg RNA或单链DNA的检测带。
  1. SYBR Safe
SYBR Safe被设计为是溴化乙锭和其他SYBR染料的更安全替代品。 它不被认为是有害废物,通常可以通过常规下水道系统(即下水道)进行处理,因为毒性测试表明没有急性毒性。
测试还表明,对叙利亚仓鼠胚胎(SHE)细胞,人淋巴细胞,小鼠淋巴瘤细胞几乎没有遗传毒性,或者在AMES测试中指出。 该染色剂可与蓝光透射照明器一起使用,这对可见的DNA造成的损伤较小,并为以后的克隆提供了更高的效率。
  1. Eva Green
Eva Green是一种绿色荧光染料,已发现其抑制聚合酶链反应(PCR)的程度低于其他染料。 这对于定量实时PCR等应用非常有用。
如果要使用低熔点凝胶回收DNA,这也是一个不错的选择。 它在高温下非常稳定,单独具有很低的荧光,但是与DNA结合时却具有很高的荧光。 Eva Green还被证明具有极低的细胞毒性或致突变性。


 
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