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RIPA裂解缓冲液介绍
Release Time：2019-11-25关于RIPA裂解缓冲液介绍
RIPA代表放射免疫沉淀测定法，缓冲液是常用的裂解液，用于裂解细胞和组织，同时防止蛋白质降解。 因此，RIPA裂解缓冲液可用于提取蛋白质以进行蛋白质分析，例如Western blot或ELISA实验。
RIPA裂解缓冲液通过苛刻的去氧胆酸钠和SDS以及较温和的NP-40的作用来溶解细胞膜和核膜。 这些去污剂的作用导致脂质膜的分解以及蛋白质与蛋白质的相互作用，从而在溶液中释放蛋白质。
不要忘记在RIPA裂解缓冲液中添加蛋白酶抑制剂，以防止任何蛋白酶过早地消化蛋白质！
RIPA裂解缓冲液配方
以下配方可用于制备100 mL RIPA裂解缓冲液。
如何制作RIPA裂解缓冲液
在RIPA裂解缓冲液的制备中处理去污剂（去离子P-40，脱氧胆酸钠和SDS）时要小心，因为它们很危险。在使用前，请务必先参阅其各自的安全数据表，以确保充分的保护。
RIPA代表放射免疫沉淀测定法，缓冲液是常用的裂解液，用于裂解细胞和组织，同时防止蛋白质降解。 因此，RIPA裂解缓冲液可用于提取蛋白质以进行蛋白质分析，例如Western blot或ELISA实验。
RIPA裂解缓冲液通过苛刻的去氧胆酸钠和SDS以及较温和的NP-40的作用来溶解细胞膜和核膜。 这些去污剂的作用导致脂质膜的分解以及蛋白质与蛋白质的相互作用，从而在溶液中释放蛋白质。
不要忘记在RIPA裂解缓冲液中添加蛋白酶抑制剂，以防止任何蛋白酶过早地消化蛋白质！
RIPA裂解缓冲液配方
以下配方可用于制备100 mL RIPA裂解缓冲液。
| 试剂 | 量 | 最终浓度 |
| Sodium chloride (5 M) | 3 mL | 150 mM |
| Tris-HCl (1 M, pH 8.0) | 5 mL | 50 mM |
| Nonidet P-40 | 1 mL | 1 % |
| Sodium deoxycholate (10 %) | 5 mL | 0.5 % |
| SDS (10 %) | 1 mL | 0.1 % |
| ddH2O | Up to 100 mL |
如何制作RIPA裂解缓冲液
- 量出3 mL氯化钠（5 M），5 mL Tris-HCl（1 M，pH 8.0），1 mL Nonidet P-40、5 mL脱氧胆酸钠（10％），1 mL SDS（10％）并加入一个100毫升的瓶。
- 用ddH2O加满Duran瓶至100 mL。
- 通过将磁跳蚤添加到瓶子中并放在磁力搅拌器上来混合试剂。
- [可选]在使用RIPA裂解缓冲液之前，将所需量的蛋白酶抑制剂（例如PMSF）添加到溶液中。
- 将RIPA裂解缓冲液在冰箱中（+ 2oC – 8oC）存放相对较短的时间（几周）。
- RIPA裂解缓冲液中的去污剂可能会随着时间的推移而重新沉淀。如果发生这种情况，请加热溶液（37oC）并混合以溶解组分。
- 对于更长的存储时间，将RIPA裂解缓冲液等分并存储在冰箱（-20oC）中。用温热（37oC）解冻等分试样，然后将各成分混合回溶液中。解冻后请勿重新冻结。
在RIPA裂解缓冲液的制备中处理去污剂（去离子P-40，脱氧胆酸钠和SDS）时要小心，因为它们很危险。在使用前，请务必先参阅其各自的安全数据表，以确保充分的保护。
