如何配制SDS-PAGE上样品缓冲液
Release Time:2019-11-25SDS-PAGE上样品缓冲液(莫里斯法)
制备上样缓冲液的目的:
如何使用SDS-PAGE缓冲液
将蛋白样品1:3稀释到4X样品上样缓冲液中,加载到SDS-PAGE缓冲液中的丙烯酰亚胺凝胶上。
配制和实用SDS-PAGE缓冲液注意事项:
β-巯基乙醇是一种严重刺激物,很容易通过皮肤吸收,SDS是固体形式的呼吸道刺激物,称重时应戴口罩。
制备上样缓冲液的目的:
- 用于将蛋白质样品制备和上样到凝胶上以进行SDS-PAGE分析(蛋白质印迹/蛋白质印迹)。
- 制备:样品缓冲液中包含的SDS使蛋白质与其长度成比例地带负电荷。 2-巯基乙醇/ DTT破坏二硫键。
- 上样:甘油使样品缓冲液比蛋白质凝胶周围的运行缓冲液更稠密,从而易于装载到凝胶袋中。
- 制作10ml,4x缓冲液
- 制备1x缓冲液:50 mM的Tris-HCl pH 6.8
如何使用SDS-PAGE缓冲液
将蛋白样品1:3稀释到4X样品上样缓冲液中,加载到SDS-PAGE缓冲液中的丙烯酰亚胺凝胶上。
配制和实用SDS-PAGE缓冲液注意事项:
β-巯基乙醇是一种严重刺激物,很容易通过皮肤吸收,SDS是固体形式的呼吸道刺激物,称重时应戴口罩。